RT-PCRについて

質問

RT-PCRをするさいに、oligoｄT３sitesAdaptor　Primerをつかっているのですが、このAdaptorの役割はなんですか？またｍRNAにAdaptor自身がひっついてしまうことはないのでしょか。それとAdaptorはｃDNA合成後も離れずprimerに結合したままなのでしょうか。教えてください。

回答No.1

geneticist12

＞AdaptorはｃDNA合成後も離れずprimerに結合したままなのでしょうか。
もちろん。原理を理解すれば聞くまでもないことです。
キットの説明書や成書を読んでください。

Adaptorに対応するプライマーでPCRをかけるため（RACE法）、または、制限酵素認識サイトを与えてクローニングに用いるためのどちらかでしょう。

プライマーは3'末端が鋳型にきっちりアニールしていないと機能しません。Adapotorはプライマーの5'に付加するものなので逆転写に影響しません。

お礼

かなり初歩的な質問をしてすみませんでした。
くわしく回答していただけて感謝します。