オープンカラムのシリカの量

質問

オープンカラムを行なう場合、
どの位の高さまでシリカゲルを重鎮したら問題ないのでしょうか？
分離したい物質によるのは分かるのですが、
最低限２cmくらいあった方が良いなどありましたらお願いします。
またサンプルの量や展開溶媒の量と絡めて、
どの位の比で行なったら良いとかあるのでしょうか？
例）サンプル：シリカゲル：展開溶媒＝１：１０：２０

回答No.1

noname#62864 · ベストアンサー

カラムの太さ、サンプル量、サンプルの分離の容易さなどによってかわってきます。
たとえば、太さが20～30 mm程度のカラムを使用して、適当な量のサンプルを分けると仮定した場合に（これも曖昧ですが）、2cmの長さで分離できるのは、きわめて分かれやすいものに限られると思います。
この太さの場合には、個人的な感覚としては10cm程度の長さにすることが多いような気がします。
分かれにくいものであれば、20cm以上にすることもあります。

なお、サンプルの量が少なくて、10mm以下の太さのカラムを用いるのであれば、2cmでもある程度分離できると思います。

すなわち、カラムの太さというのも重要な要因だと思います。

それと、展開溶媒の量をあらかじめ設定することはないと思います。やってみなければわかりませんから、分離の様子をチェックしながら、終点を決めるのが普通だと思います。

お礼

さすがに２cmでは分離は厳しいようですね。
展開溶媒の量は様子をみながら決めたいと思います。
ありがとうございました。

回答No.2

noname#160321

＃１のお答えは原則的なものですが、それ以外に考えるべきものはまだあります。
まず、シリカゲルを使うとして。
１.メッシュ数
２.水分含量(いわゆる活性度)
これらは、最初には分かりませんので、予めＴＬＣなどでの値、それもＴＬＣの「多重展開」などをして確認します。
非常に分かれやすければ。E.Merck社のドライカラム用シリカゲルに乗せて、どかっと分けてしまう「半日」作業のことさえあります。
(この場合活性度は最小)

お礼

事前にTLCにより色々チェックしておく必要があるのですね。
E.Merck社のシリカゲルもチェックしてみたいと思います。
ありがとうございました。