DPPH法についてご存知の方、教えてください。

質問

DPPH法でイモの抗酸可能について実験をしています。
ですがなかなか上手くいかず、何点かご教授頂きたいです。

（１）紫色が反応することで脱色し黄色くなる、と見聞きしたのですが、DPPH溶液自身はオレンジ色で、サンプルと混ぜても色は変わりません。反応後は若干薄く(黄色く)なっているみたいですが、紫色にどうしてもなりません。
どの段階で間違っているのでしょうか。DPPHの溶かし方が悪いのでしょうか。

（２）上記の状態でも一応吸光度を測ったのですが、標準物質の濃度が違うものでも、値はほぼ同じでした。(例：50ppm、100ppm、200ppmでも、吸光度は0,106、0.104、0,107のようになります。)おそらく（１）の時点で間違っているからだと思うのですが・・・

色々試行錯誤したのですが、上手くいきません。おわかりになる方、教えて頂けないでしょうか。
どうぞよろしくお願いします。

回答No.2

coromallo

500μMは試したことないんです。すいません。

200μMの場合ですがボルテックスするだけで溶けました。
500μMならちょっと溶けにくくなるかもしれません。超音波との併用をお勧めします。

回答No.1

coromallo

大学院生ですがDPPH法をやったことがあるので回答させていただきます。

見た目の色と吸光度から判断して濃度が明らかに薄いです。
DPPHが溶けてないんじゃないでしょうか？

100%エタノールなら完全に溶けて50ppmでもかなり濃い紫になりますよ。

お礼

ご回答ありがとうございます！

DPPH溶液は500μMで作っています。
一応粉末が無いか確認してから、サンプルと混ぜているのですが・・・。
DPPH粉末を完全に溶かすためには、エタノールを入れるだけで溶けますか？
それともスターラーや超音波にかけるなどありますか？

何度もすみません。
ご回答頂ければ嬉しいです。
どうぞよろしくお願いします。