- ベストアンサー
CaMV35Sプロモーターについて
- みんなの回答 （1）
- 専門家の回答
質問者が選んだベストアンサー
http://www.sciencedirect.com/science?_ob=ArticleURL&_udi=B6T3C-491C38S-1&_user=149009&_coverDate=08%2F15%2F2003&_rdoc=1&_fmt=&_orig=search&_sort=d&view=c&_acct=C000012358&_version=1&_urlVersion=0&_userid=149009&md5=7a00f59606bb153fc1747b255e05d0cb まったく活性をもたない、というわけではないようですが、上記の論文の要旨を見るとCMVプロモーターの0.01%程度の活性しかないようです。 ですので、そのままLucアッセイを実施するのはちょっと難しそうです・・・。
関連するQ&A
- 35Sプロモーターとは？
タイトルどおりなのですが、35Sプロモーターの35Sとはどういうことですか？また、プロモーターの場合35S以外もあるのでしょうか。あれば、機能の違いなどについても教えてくださいm(__)m
- 締切済み
- 生物学
- 遺伝子発現でのプロモーターについて
GFPと他の興味ある遺伝子を1つのプラスミドやウイルスで共発現させようと考えています(ク○ーンテック社で出てるのは知ってます)。その場合、SV40とCMVの2種類使ったほうがいいのでしょうか？たとえば、1種類のみで、SV40をそれぞれにつけた場合はあんまりよくない気がしているのですが、どうなのでしょうか？また、こういったプロモーターと遺伝子発現に関する実用的な書籍、Web Site(国内外ともに)を紹介していただけたらと思います。できたら組織特異的な(脳、心筋や骨格筋など)プロモーターに関しても知りたいのですが。かなり未熟ですが、よろしくお願いいたします。
- 締切済み
- 生物学
- ルシフェラーゼアッセイの細胞について
ルシフェラーゼアッセイを今度行おうと思っている初心者です。 プロモーター領域を入れたプラスミドを発現するのに使う細胞についてなんですが…。 目的のタンパクがニューロンで発現する、ということで(実際には他の組織でも発現しますが、問題にしたいのは神経細胞においての発現なので)、人神経細胞由来の細胞を使いたいのですが、あるのでしょうか? 理研のバンクを覗いてみても、アストロサイトなどのグリア系のやつしかないように見えるのですが、どうなのでしょうか。
- ベストアンサー
- 生物学
- 遺伝子組み換え、ベクター、
遺伝子発現の宿主として用いられるのは大腸菌のような細菌だけではなく、目的遺伝子を動物細胞や植物細胞に導入して発現させる場合もある。動物細胞および植物細胞に目的遺伝子を導入して発現させる手法としてはどのようなものがあるか、調べて述べよ
- 締切済み
- 生物学
- 抗生物質を用いた安定発現株に関して
よくネオマイシン耐性遺伝子を含むプラスミドをリポフェクションによって細胞に導入し、ネオマイシンによってセレクションを行って安定発現株を得ると言う実験が行われていると思います。 この安定発現株って、細胞がプラスミドをプラスミドの形で安定に保持し続けているんでしょうか？ それとも染色体内に組込まれて保持されているものなんでしょうか？ 調べてみたけどよくわからなかったので、どうか教えて下さい。
- 締切済み
- 生物学
- プロモーター解析
全くの素人です。遺伝子工学ハンドブックを購入しだいそちらも参考にしますが、今はまだないので教えていただければと思います。 レポーター遺伝子つきのベクターに調節領域を挿入して対象細胞での発現を見る方法は分かったのですが、その他の方法で混乱してしまいました。S1マッピングという方法がありますが、参考書の図を見ても理解できませんでした。これは、プロモーター領域を含む5'プローブでmRNAとハイブリダイズさせた後、S1で切ってハイブリダイズした部分だけを電気泳動しているようですが、プローブをDNA上の調節領域とmRNAコード配列の境界となるように設計して、電気泳動でのサイズからその部位（転写開始点やスプライス部位など）を調べるということで良いのでしょうか？この場合は当然転写調節の標的となるmRNAを用いると思いますが、レポーターアッセイの場合はこのmRNAがGFPやルシフェラーゼになっている訳ですよね？ また電気泳動でサイズが分かったら、標的調節領域に変異を導入して詳しい機能を調べるという手順でしょうか？ 実験せずに想像で書いていますので、誤りを指摘して下さると助かります。
- ベストアンサー
- 生物学
- 組換え遺伝子
組換え遺伝子って、目的のタンパク質をコードする遺伝子に、プロモータやエンハンサーをくっつけてるんですよね？ で、その種類なんですけど、アデノウイルス由来とか、サイトメガロウイルス由来とか、いろいろありますよね？ 種類によってどんな働きをするのでしょうか？ 遺伝子にはほとんんど無知なのですが、使わなくてはいけなくなりました。 ヒトCMV-IEプロモーター／エンハンサー下流に変異させたGFPをコードするシークエンスを配置したプラスミドで、GFPの上流にあるNhe(1)サイトでのみGFPとの融合タンパク質ができます。動物細胞中でのGFP高発現に用いられます。 ↑こんな説明を理解するためには、どう勉強したら良いのでしょうか？ 参考書の紹介でも構いません。 ご教授下さい！
- ベストアンサー
- 生物学
- 遺伝子組換えについて
異種DNAの由来生物が動物や植物の場合には、大腸菌では目的遺伝子がうまく発現しない、あるいは発現してタンパクがつくられても酵素の活性が得られないといったことがしばしば起こる。その場合、一般的に考えられる原因として何があるか調べて述べよ。 これについて、少しでもわかることがあれば教えてください！ お願いいたします！
- ベストアンサー
- 生物学
