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sv40 oriについて
現在、目的タンパク質とEGFPをIRESを用いて共発現する安定発現株を HeLa細胞において作製中なのですが、うまくいきません。 ・蛍光を発している細胞が死滅してしまう ・蛍光が弱くなって確認できなくなってしまう 以上2点のうちどちらかが原因だと自分では思うのですが、 遺伝子導入に用いているプラスミドベクターにはsv40 oriが存在しており、これによりプラスミドが細胞内で複製されすぎて細胞が死ぬということは、このケースでは起こるでしょうか? どなたか詳しい方よろしくお願いします。
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お礼
ありがとうございます。 今回使用しているベクターも条件も特殊なものではないので SV40 oriによって複製が進み、細胞が死んでいるとは考えにくいですね。 ブロット解析などを行い、発現を確認したいと思います。