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核酸の除去
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質問者が選んだベストアンサー
冷たいエタノールを使えば核酸が沈殿するので分離できると思いますが。
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- ice_rif
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細胞抽出液から核酸を吸着除去する樹脂が市販されています。 会社は、ワットマンかフナコシだったと思います。 エタノール沈殿はタンパクも沈殿する可能性があるし、フェ ノール抽出でほとんどのタンパクは変性します。
お礼
どうもありがとうございました。やはり、クロマトグラフィーを使う方法が、最も適当なのですね。参考になりました。
- poyopoyoyon
- ベストアンサー率30% (133/438)
酵素により分解というのは制限酵素による部分的消化ですか。 それともヌクレアーゼのような酵素で処理したのでしょうか。 ばらばらに分解した核酸の回収はできないと思いますが。 制限酵素で切った、ある程度の長さのあるものなら 1の方のおっしゃるようにエタ沈で十分だと思います。 フェノール/クロロホルムを用いてもいいですが廃液処理が面倒ですね。
お礼
回答ありがとうございました。フェノール/クロロホルムは、エタ沈で上手くいかなかった時の奥の手とします。
- ice_rif
- ベストアンサー率20% (68/325)
分解した核酸を分留することはできないと思います。 何をやりたいのか説明してくれれば、回答できると 思います。
補足
遺伝子組み換えE.coliの細胞内タンパク質を精製したいと考えています。細胞膜は遠心分離機で除去しましたが、核酸をFADの基準値まで除去する方法を考えています。よろしくお願いします。
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お礼
ありがとうございます。早速やってみます。エタノールだと廃液処理も楽でいいですね。