逆相HPLC

質問

パラベン系保存料の分離を行ったのですが、MEP、ETP、PRP、IBR、BTPの順にピークがでてきました。
どうして分子量が軽い物質が最初に出てくるのですか？分子量は関係ないですか？
また、一般的に今回測定した物質は溶質時間は近いといえますか？（5-17minにピークがでてきた。）
近い物質はクラジエントの方が良いと聞きましたが　、アイソクラクティックではどうでしょうか？（メタ80：水20）

回答No.1

akz01 · ベストアンサー

逆相HPLCとのことですので、分子量と溶出順は関係ないはずです。
カラム充填剤との相互作用が弱いものから先に出てきます。

現在の条件でピークがきちんと分離できているのなら、アイソクラティックのままで良いと思います。
（グラジエントにすると、再現性が微妙にあやしくなることもあります。また、連続分析の場合は、安定化待ちが必要になります）

このあたりは、装置メーカーのウェブサイトに解説があります。

(株)日立ハイテクノロジーズHPLC　基礎講座
http://www.hitachi-hitec.com/science/lc_basic/lc_course.html
（今回のご質問だと、特に第1回と第4回が参考になるかと思います）

(株)資生堂　カラムの選択
http://www.shiseido.co.jp/hplc2003/column/html/col_sele.htm