- 締切済み
ペプシン活性の測定法について
- みんなの回答 （1）
- 専門家の回答
みんなの回答
- elpkc
- ベストアンサー率53% (626/1160)
http://jpdb.nihs.go.jp/jp15/YAKKYOKUHOU15.pdf の 492/1786ページに出ているのでご参考されてみてください
関連するQ&A
- 吸光度によるプロテアーゼ活性測定について
プロテアーゼ活性についていまいち理解できないので教えて頂きたいです。 今回、ヘモグロビン溶液に、5μg/ml、10μg/ml、15μg/mlに希釈したペプシン溶液を加え、TCA溶液で反応を止めて、遠心分離してできた上澄み液の吸光度を測定する実験でした。 また、それぞれの濃度には1本のブランクを用意し、ヘモグロビン溶液にあらかじめTCA溶液を加えておき、そこに各濃度のペプシン溶液を加えて吸光度を測定しました。 教本に「反応液の吸光度からブランクの吸光度を差し引いた値がプロテアーゼによって遊離してきたアミノ酸量に相当する。 反応液中のTCA可溶性物質（遊離したアミノ酸）の280nmでの吸光度0.001の1分間あたりの変化が1単位に相当する。 1単位＝280nmでの0.001の吸光度変化/1分間」と書かれており、 プロテアーゼ活性を計算しなくてはならないのですが… そもそもプロテアーゼ活性とは何なんでしょうか…。調べはしましたが、文献に載っておらず、いまいち理解できませんでした。 それから、例えば、吸光度が 反応液：0.830 ブランク：0.339 の場合、単位は何単位になるのでしょうか？ 回答下さると助かります。宜しくお願いします。
- ベストアンサー
- 生物学
- Mitogen活性測定法
こんにちは。 私は化学を専門に学んでいる修士2年のものです。 現在天然物を取り扱った実験を行っているのですが、成分分析に行き詰っています。活性を測定する方法として“Mitogen活性測定法”という測定法があると聞きました。ネズミの脾臓細胞を利用した方法らしいのですが、測定の目的(この測定をして、何がわかるのか)、詳しい方法、原理など、ご存知の方がいらっしゃいましたら教えてほしいです。 専門分野外のため知識不足で恥ずかしいのですがどうかよろしくお願いいたします。
- ベストアンサー
- 生物学
- カタラーゼ活性測定方法について
菌のカタラーゼ活性を測定しようとしているのですが、うまくいきません。吸光光度計でＯＤ240で測定しています。 手順が間違っている可能性が出てきたので、よろしければ吸光度計を使った正しい測定方法を教えていただけないでしょうか？ 現在は下記の方法で行っています。 菌懸濁液を１および10mg/mlに調製し、それぞれ0.3mlをよくホモジネート後10000rpmで10min遠心。 上澄みにＰＢを2.4ml加えて懸濁させたものを測定試料とする。
- ベストアンサー
- 生物学
- ペプシン活性の時間変化について
なぜ、ペプシンと基質を反応させる時間を増やすと、吸光度(A280,OD280)が増加するのでしょうか。 実習で、ヘモグロビン溶液を基質として、ペプシン(酵素)を混ぜた時、一定の時間ごとに吸光度(280nmの紫外線をあてました)を測定しました。 吸光度と時間を対応させたグラフは、 最初に直線的に増加した後に、頭打ちしたような形になったのですが、 ペプシンと基質を反応させる時間を増やすと、吸光度(A280,OD280)が増加する理由が理解できません。 トリプトファンやチロシンなどのアミノ酸は紫外線の吸収極大が280nm付近なので、 吸光度は、トリプトファンやチロシンなどのアミノ酸量を示す…と理解していたのですが、 この理解だと、 酵素と基質を反応させる時間を増やし、 ペプシンによって例えペプチド結合が切り取られる部位が増えたとしても、 トリプトファンやチロシンの割合は変化しないはずではないか… という結論に至ってしまいます。（結果との矛盾） ペプシンによって基質が切り取られると、 トリプトファンやチロシンが露出する形となり、 吸光度が上がる…というのが今のところの私の予想なのですが、 この予想であっているのでしょうか。 理由を知っている方や、こういう考え方もあるのではないか、という提案のある方は教えて頂きたいです。よろしくお願いいたします。 また、このペプシン活性測定方法は、Anson法というらしいのですが、 このAnson法について詳しい文献を知っている方がいらっしゃいましたら、 それも教えて頂きたいです。 長々とすみませんが、ご回答よろしくお願いします！
- 締切済み
- 生物学
- 酵素活性の簡易的な測定法
植物中のSODやNADPH酸化酵素の活性の簡易的な測定法を探しています。活性を具体的な数字で表すのではなく、目で見てわかるようなもの（色の変化など）で表したいと考えています。専用のキットがあることは知っているのですが、かなり高額なので・・・(・・；) 良い方法があったら教えてくださいm(．．)m
- 締切済み
- 農学
- ミセル会合数の測定法
ＳＤＳ等の界面活性剤のミセル会合数測定法はどんなものがあるのでしょうか？簡便で、特殊な機器を用いることのない測定法ってあるのでしょうか？ 界面活性剤の書籍で蛍光プローブという言葉を目にしたのですが、蛍光を発する試薬と蛍光光度計があれば測定できるのでしょうか？ 具体的なミセル会合数測定方法を知っている方がいましたら教えてください。
- 締切済み
- 科学
- 唾液アミラーゼの活性測定方法 !!
ただ今、唾液アミラーゼの酵素活性測定を行っています。そこでヨウ素デンプン反応法を用いました。ここでお聞きしたいのですが、唾液アミラーゼの酵素活性を測定する際に、ヨウ素デンプン反応法以外の方法で活性を測定する方法を教えて頂けないでしょうか。ぜひお願いいたします。サイトの添付のみでも非常に助かります。
- 締切済み
- 農学
- 界面活性剤の解離度測定法を教えてください。
誰かアニオン型界面活性剤の解離度の測定法を教えてください。界面活性剤はスルホン基にナトリウムが塩としてついている形なので、通常の方法(滴定?)では出来ません。通常こういった塩の形の界面活性剤の解離度はどうやって測るものなのでしょうか。計算による算出法でもかまいません。
- 締切済み
- 化学
- GFPを使ったプロモータ活性測定
プロモータ活性を測りたい時、今の主流はルシフェラーゼアッセイですねよ。 でもGFPのほうが発光試薬も必要ないし、遺伝子サイズも小さいしで、 おんなじことをGFPでやったほうが便利なように思うのですが。 少数ながらGFPでプロモータ活性を測定している実験もあるみたいですがあまり一般的ではないようですし、 そういうキットを発売しているメーカーも見つからないです。 やはりルシフェラーゼにはGFPには変えられないメリットがあるのでしょうか？ ダイナミックレンジが広いとか？測定機器が比較的安い？シグナルが強い？ 何かご存知の方、GFPでプロモータアッセイしている方いらっしゃいましたら教えてください。
- ベストアンサー
- 生物学
