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内皮細胞の培養方法について

現在、卒業研究のため血管内皮細胞の培養を行っています。 今回、より生体内に近い条件としてトランスウェルという培養容器での培養を試みることにしました。 しかし、培養する細胞は初代培養(primary culture)で、増殖因子を添加した状態でトランスウェル上で培養すると、血管のようになってしまったり、 あるいは、メンブレンフィルター上で不均一な増殖をしたり・・・ 実験に使えるような状態に、上手に培養することが出来ません。 どなたか、トランスウェルを用いた血管内皮細胞の培養方法をご存知の方、方法やアイディアなどありましたら教えてください。

みんなの回答

  • ebikichi
  • ベストアンサー率35% (75/213)
回答No.1

培養し過ぎでは?

madetypeplanet
質問者

補足

長期培養はしてないんです。トランスウェルに0.8*10^5cells/Wellほど(ちょっと濃いです)で継代して、5日ほどで組織片のような状態に。 トランスウェル販売元の資料に、別の細胞ですが「タイトジャンクション形成は3週間培養が目安」とありました。

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