緩衝液

質問

リン酸水素ナトリウムを含む培地(pH6.0)200mlに緩衝液(pH4.0)を50ml入れてもpHが4.0にならずに5.2とかになってしまうのですがなぜなんでしょうか？？よろしかったら教えていただけないでしょうか。お願いします。

回答No.3

c80s3xxx

>塩酸て微生物に悪影響を与えたりしないのかな？

微生物次第でしょうが，先に予備実験をやればいいんですよ．
まず培地にpH4の所定量の緩衝液を入れて，そこにある程度濃い，濃度のわかっている塩酸を加えて pH4 にします．4にするのに必要だった塩酸の量を測るわけです．これをあらかじめ pH4 の緩衝液に加えてから培地に入れればいいわけでしょう．pH が上がってしまえば，塩酸も塩化ナトリウムも同じことですので．
なお，培地の厚みにもよりますが，培地と添加した緩衝液が平衡に達するにはかなり長い時間がかかるでしょう．培地の中の pH を監視するのは面倒ですが．
そういうことを考えると，pH4 の緩衝液の濃度を限界まで高くする(浸透圧的に問題があるかもしれないが)とか，考えるべきなのかもしれません．
いずれにしても，何をどうしたい実験なのかがわからないので，言えるのはこのくらいでしょう．

回答No.2

c80s3xxx

> リン酸水素ナトリウムを含む培地(pH6.0)

つまり，これは pH 6.0 の緩衝液ということです．リン酸塩は6から7程度の pH で緩衝剤になります．
6に保とうとする緩衝液と4に保とうとする緩衝液を混ぜているのですから，中間に付近なるのはある意味あたりまえでは?
リン酸塩濃度と pH4 の緩衝剤の種類と濃度がわかれば，混合後の pH も計算できますが，4にしたいのなら4に緩衝作用を持つ成分を入れておいて，強酸を併用して目的 pH に下げるとかが必要です．

お礼

なるほど～
お二人様回答ありがとうございます。
自分も調べてみたのですが、リン酸ナトリウムが緩衝作用を持っていたためにこういう結果になってしまったのですね。
ということは培地のリン酸ナトリウム濃度を変化させれば解決できるんですかね？？

あと強酸てことは塩酸などを添加すればいいんですよね？
塩酸て微生物に悪影響を与えたりしないのかな？
なんか幼稚な質問ですみませんがよろしくお願いします。。。

回答No.1

murmed

緩衝液の量が、培地に対して少なすぎると思います。

　緩衝液というのはそもそも、pH変化を少なめに抑える性質を持った液のことです。pHを変えない液というものは存在しません。
　例えばpHが6になるはずが、緩衝液のために5.2に抑えられたということです。その意味では、ご質問の条件でも緩衝効果は少しは出ています。

　培地の条件を整えるためには、緩衝液の濃度を濃くするか、量を増やす必要があると思います。