植物からの物質の単離について

質問

私は、植物からの抗菌物質の単離を行う予定です。しかし、周りに経験者も全くなく、本を調べても情報がありすぎて具体的にどのようにすればいいのかわからず、途方にくれています。
現在、対象となる植物の葉からエタノールで抽出したものに抗菌効果がありました。次にカラムを用いて単離をしたいと思っています。こういった場合、普通であれば、どのように実験を進めるのでしょうか？
抽象的な質問で申し訳ございませんが、助言をお願いいたします。

回答No.3

nejibana

私の研究室の方が植物から抗菌物質を単離していましたが、TLCの前にまず酢酸エチルやヘキサンなどで、
エタノール抽出液を濃縮した水分画を振り取り、
植物のクロロフィルや糖といったものを除去することをお勧めします。もちろんこの各分画について、どの分画に抗菌活性がいったのかを確認する必要はありますが、エタノール抽出液のままTLCにサンプルをのせても、重くて上に上がらないか、相当な枚数になってしまうはずです。仮にシリカゲルでも上に層になってつまってしまったりします。
その上でみなさんのおしゃってる方法をやってみてはいかがでしょうか？？

お礼

ありがとうございます。教科書などにのっていないことを教えていただき、参考になります。

補足

エタノール抽出液を減圧濃縮し、ヘキサンに再溶解して、液－液間での物質の分画法に従って、分画を行いました。すると、酸性物質と中性物質の画分に活性が見られました。しかし、ヘキサンに再溶解した際に、ヘキサンに解けない残渣があり、それをエタノールに溶かすと、わずかですが抗菌活性が確認されたので、抗菌活性のロスの問題があります。対象となる物質の特性が分からない場合、TLCなどを行うときの展開溶媒の検討はどうすればよいのでしょうか？　本当に基本が分からなくて申し訳ありません。