• ベストアンサー

セルカウントについて

細胞のセルカウントを行う際、死んだ細胞が混ざっていてもカウントできるようなのですが、生きた細胞と死んだ細胞はどうやって区別してカウントすることができるのでしょうか?

  • inmo87
  • お礼率29% (170/577)

質問者が選んだベストアンサー

  • ベストアンサー
  • otx
  • ベストアンサー率44% (256/576)
回答No.1
inmo87
質問者

お礼

回答ありがとうございます。

関連するQ&A

  • 教えてください!血球計算盤の使い方

    血球計算盤で培養細胞を数えられません! ピントのあわせかたによって、培地に混じったゴミが 半透明にそれっぽくみえたり、もやっと大きく見えたりしますよ・・ね? あれと細胞の区別がつかないんです・・・。 血液細胞なら大丈夫でした。 が、培養細胞だと、これゴミ??細胞がクシャッとしたやつ??と どうしても自信がもてません。 教えてもらったり、人が数えた結果から推測してみるのですが、 それでも自信をもってカウントできず・・・。 (ちなみに人が数えた結果とは明らかに違う数値が出ることがあります) なんで、こんなことでつまずくんだ~??って感じです。 血球計算盤に細胞がのってる画像(視野中に何個細胞がみえてるのか書いてあるもの) ってどこかにないでしょうか~??もし知ってましたら教えてください。 wikiはみました。(20区画に35個くらい・・でいいんですよね?)

  • 癌細胞のコロニーカウントについて質問です。

    癌細胞のコロニーカウントについて質問です。 癌細胞に放射線を当ててコロニー生成する率を調べています。放射線の量を増やすごとに植える細胞の数も増やしています。たとえば2Gyの時は4,000、4Gyの時は40,000のように。50細胞以上を含むコロニーをカウントするように決めて、2週間後のカウントにしています。 前立腺癌の細胞で分裂速度が非常に遅いタイプです。 結果として、2Gyはいいのですが、4Gyのプレートには数個ずつしか細胞を含まない小さなコロニーが数百個残っています。しかし一つのコロニーに含まれる細胞は50個以下なのでカウントは0個になります。しかしコロニーを数えるのが実験の目的なので0個では困ります。 質問ですが、この場合 4Gyのプレートに植える細胞を増やすべきなのか減らすべきなのか。あるいは3週間後のカウントにするべきなのでしょうか。 どなたか、アドバイスをよろしくお願いします。

  • 顕微鏡下でGFPが光っている細胞をカウントしたい

    とてもものぐさな研究者です。 核染色の細胞数とGFPの細胞数を自動でカウントしてくれるソフトがあれば、簡単に導入率とか計算できるのに、と思うのですが、そのようなソフトはないでしょうか? 現在は写真を撮って、日本野鳥の会のようにカチカチ、青い細胞がいくつ、緑の細胞がいくつ、とカウントしています。

  • 血球版での細胞数の計測。均等に散らばりません。

    ビルケルチュルク血球版を使って癌細胞の細胞数をカウントしているのですが、うまく細胞が均等に散らばりません。顕微鏡で見ますと、細胞が偏っている事が多々あります。 工程としましては、 細胞懸濁液10μlをカバーガラスと血球板にの間に流し込み顕微鏡で見てカウントするという方法なのですが、 何か良い解決方法は無いでしょうか。 倍ぐらい細胞数が違う区画が多々あります。 ご教授お願い致します。

  • bioassayについての質問

    マウスのプロラクチンをNb2細胞で測っているのですが、検量線がうまく引けません。また、細胞のカウントにばらつきが出てしまいます。何かいいアドバイスがあれば教えてください。お願いします。

  • 細胞播種(96well)のコツを教えてください。

    閲覧ありがとうございます。 今年10月にバイオ系の研究室に配属されました大学3回生です。 以前細胞の継代について質問させて頂き、お陰様でようやくパスは安定して出来るようになりました。 現在、96wellプレートを用いたグロースのカウント(培養)が上手く出来ず大変困っています。 癌細胞(浮遊、接着)を細胞培養専用のフラスコを使って培養しています。 継代の際は、細胞液をチューブに移して遠心にかけ、上清を吸って培養液(RPMI)を入れ数個のフラスコに分けます。 その際、その細胞液をさらに培養液で希釈し2×10^4cell/mLで100μLずつ96wellプレートに播種し、毎日グロースを算定板を用いてカウントします。 3回くらい播種しましたが、毎回細胞が思うように増えず、恥ずかしながら多くても本来のピークの1/10程度です・・・ フラスコに継代した細胞は順調に育ち、播種後のプレートを顕微鏡で覗いた時は大体均等に細胞が確認出来るのですが、その後培養液の色はほとんど変わらず・・ プレートは一日UVに当てる、マイクロピペットでのピペッティングを十分に行うなど自分なりに気をつけているのですが、何度も失敗しているので播種する時の操作が悪いと考えてます。 同級生も皆同じ方法で播種し、カウントしているのですが結果は結構ばらついていて、自分のようにピークが極端に少ない人もいるようです。また、一番上手くいっている人でもピークは昨年の先輩のデータの半分程でした。 初めは1×10^4cell/mLで播種しましたが、育ちが悪いので2×10^4cell/mLに変更しました。 しかし結果はほとんど変わらず、死細胞が極端に多くなります。 細胞播種の操作で、気をつけるべき事やここで失敗しやすいなど、アドバイスがあれば教えて頂きたいです。 また、プレート内の接着細胞をはがす際、どのくらいの間EDTAに浸ければ良いのかも知りたいです。何度もピペッティングすれば大丈夫なのでしょうか? あまり長い間EDTAを入れていたら細胞が死んでしまう様なので… 質問が多くて申し訳ございませんが… 安定して良い結果を出せるように頑張りたいので、よろしければアドバイスをお願いします。

  • 特定の人の細胞だけ取り出せますか

    たとえば、複数の人の唾液が混ざった試料があるとして、 そこから特定の人の細胞だけ取り出すことは可能でしょうか? そもそも自分の細胞と他人の細胞を区別することはできるのでしょうか? もしできるのでしたら、その方法などについて教えてください。 細胞のことに関しては素人です。

  • 暗順応したヒトの光源の色認識について

    ヒトの視細胞についての質問です。 暗いところでは桿体細胞が働いて色の区別がつかない一方で、明るいところでは錐体細胞が働き色が識別できるといいます。 ところが暗い部屋で、赤LEDランプが点灯している場合、暗順応したヒトでも赤い光を認識することが出来ます。 これは暗順応しても部分的には錐体細胞が機能しているから赤色を認識できると考えればいいのでしょうか? 減光フィルターを赤色LEDに被せて桿体細胞で捉えられるぎりぎりの輝度まで抑えた場合だと、暗順応したヒトは、光っているかどうかの区別が付くだけで、色の区別はつかないのでしょうか?

  • レクチン(SBA)

    免疫学でよく使われるレクチンでSBAというのがありますが、これは脾細胞のB細胞とT細胞を区別するのに使われるそうです。多分、SBAはB細胞に結合し、T細胞には結合しないと考えたのですが、それはなぜですか?

  • 多検体の細胞数を効率的に測定するには

    血球計算盤ではとてもやりきれそうにありませんが、80サンプル程の細胞の増殖の様子を見るために細胞数を連日カウントするとしたら、どのような方法が一番効率が良いのでしょうか?