- 締切済み
CBBRによる染色法
SDS-PAGEをしたゲルをCBBRによってタンパク質を染色することができるそうですが、CBBRとはどういった物質であるのか。またタンパク質をどういった原理で染色するのでしょうか。どなたか教えてください。
- teketeke9684
- お礼率100% (1/1)
- 生物学
- 回答数1
- ありがとう数32
- みんなの回答 （1）
- 専門家の回答
みんなの回答
- mizu_atsu
- ベストアンサー率41% (180/433)
参考URLのブラッドフォード法のところに 「酸性溶液中，青色色素（クマシーブリリアントブルーG250）がタンパクと結合すること」 とあります。 染色液には酢酸も配合するので酸性になっています。 ※クマシーブリリアントブルー略称はCBBRでしょうか？ Rが余分な気がします。 クマシーブリリアントブルーR250のことを言っているのでしょうか？
関連するQ&A
- PVDF膜を銀染色することは可能ですか？
SDS-PAGEのゲルからPVDF膜に転写した全蛋白質を検出したいのですが，タイトルの通り，PVDF膜も銀染色することは可能なのでしょうか。 PVDF膜がCBB染色できることは知っていますが，数ng/laneの蛋白質を検出するにはより感度の良い方法が必要なのです。 愚問で申し訳ございませんが，御教示お願いいたします。
- ベストアンサー
- 生物学
- coomassie blue染色とゲル乾燥
タンパク質実初心者です。先日、SDS-PAGEのあとcoomassie blue 染色し、ゲルドライヤーで乾燥したらバラバラになってしまいました。前に1回やった時はうまくいったのですがゲルがばらばらになる原因は何かあるのでしょうか？ご教示いただけないでしょうか。ドライヤーの条件は70度、50分でやり、ゲル濃度は10％です。前回はゲル7.5％でやったのですが、濃度が濃くなると割れやすいことってありますか？
- 締切済み
- 生物学
- ウェスタンとCBB染色のマーカーについて
ウェスタンブロッティングとCBB染色でタンパク質のバンドの位置が異なります。 私は分子量22kDaのタンパク質を扱っているのですが、SDS-PAGE後CBB染色をするとマーカーの20kDaよりも下にバンドが出てきます。 しかし、SDS-PAGE後ウェスタンブロッティングすると、普通に20kDaより上にバンドが出るようになります。 それぞれ使っているマーカーは異なるのですが、こんなにもずれが生じるものなのでしょうか。
- ベストアンサー
- 生物学
- 銀染色、ゲルの色について
15%ゲルのSDS-PAGEでタンパク質を泳動し、銀染色を行いました。 そのとき銀染色液に浸透した段階でゲル全体が着色し始め、薄らとバンドが見えてきました。 その後も何度か同じ濃度のゲル・同じ試料（調整日時は両方とも違う）で泳動を行ったのですが、現像液をかける前からバンドが見え始めるようなことはありませんでした。 いったいなぜ初回の泳動時だけ現像前に着色が始まったのでしょうか。 理由をご存知の方がいらっしゃいましたら、ご回答をお願いします。
- 締切済み
- 化学
- PAS染色による糖鎖（糖タンパク）検出
タンパク質の精製を行っており，精製されたタンパク質が糖タンパク (glycoproteins) であるかを確認したいです． 検出方法として膜に転写した後 PAS 染色で検出する方法があることを知ったのですが，調べてみると SDS-PAGE で泳動後ゲルを直接PAS染色できるみたいです．（SIGMA からでている Glycoprotein Detection Kit みたいなキットを使わずに今ある試薬で行いたいです） その方法（プロトコール）が書いてあるサイト・参考書等，ご存知の方よろしくお願いします．
- ベストアンサー
- 生物学
- 蛋白のLC-MS用サンプルについて
免疫沈降後に得られた蛋白についてLC/MS/MSでの同定を行っています。 免疫沈降後にSDS-PAGE⇒銀染色⇒切り出し・ゲル内消化⇒MS解析という手順で行っています。 しかし、サンプルによってはCBB染色でバンドが確認できるので、CBB染色の状態でバンドを切り出し、Trypsinによるゲル内消化を行おうと思っているのですが、可能でしょうか？ クマシー染色のバンドを切り出してチューブ内で脱色⇒ゲル内消化とも考えているのですが・・・・。 初心者なので、あまり詳しくないので、初歩的な質問かもしれませんが、よろしくお願いいたします。
- ベストアンサー
- 化学
- 同じタンパク質なのに分子量が違うのはナゼ？？
今SDS－PAGEを扱っています。 あるタンパク質についてなのですが、 SDS-PAGEを用いて分子量を測定したら３万になり、 変性させずにゲル濾過クロマトグラフィーを行うと１２万でした。 実験操作がおかしいわけではないと思うのですが、いろいろと調べてみても納得のいく答えが出ません。 このタンパク質についてどのようなことが言えるのでしょうか？？ ぜひ教えてください。
- ベストアンサー
- 生物学
お礼
ありがとうございます。RはR250のようです。