トランスジェニックは交配で導入遺伝子消失？

質問

現在トランスジェニックマウスを作製して行動を見てます。
でも交配するごとにphenotype（多動性とか）がなくなったように思います！
実際に交配で導入遺伝子がなくなるとかそういう報告はあるのでしょうか？
また、ノックアウトマウスだと交配してもなくなることはないと聞きましたがどうなのでしょうか？

教えてください！
よろしくお願いします！

回答No.2

negigi · ベストアンサー

＞もらった動物の行動解析のみをしている
その場合でも、genotypingは自分のところでしておくべきですが、もちろん、してますよね。以前、知り合いが供与してもらったTGマウスについて、先方はTGホモだと言っていたにも関わらず、いざ交配すると、PCR結果からTGのバンドが消えたことがありました。不思議でもなんでもなく、貰ったマウスが実はヘテロだっただけの話です。

トランスジェニックは、変異遺伝子なりマーカー遺伝子なりをゲノム中にランダムに導入するわけです。それゆえ、たいがいのgenotypingでは、変異遺伝子の有無を確認するのみです。だから、ホモかヘテロかは、その子孫のgenotypeで判断するしかない、という場合が多々あります(だから、めんどくさい)。

一方のノックアウトの場合は、変異の入った場所がはっきり分かりますから、PCRだけでも、ホモ変異かヘテロ変異かの判別は容易に行えます。そのあたりは、なんとなくでも分かりますか？だから、確実にホモホモ交配を行えるので、genotypingしなくてもよくなる場合もあるのです。

＞こういった認識は正しいのでしょうか
正しいか正しくないか、でいえば、まあ、正しくないです。
TGの目的は、過剰発現の他にも、上に書いたように、発現マーカー遺伝子の導入だとか、いろいろあります。だから、変なphenotypeを期待するものもあれば、そうでないものもありますね。

さらに、遺伝子というのは実に気まぐれで、過剰発現させたからといって、変なphenotypeが出るとは限らないし、逆に、マーカーを導入しただけなのに、その変異挿入部位によっては、変なphenotypeが出たりすることもあるみたいですよ。あと、過剰発現の表現型とKOの表現型が同じだったって話も、聞いたことあります。その研究者も、「どう評価したらいいか分からん」と、嘆いてましたね。

だから、
＞ノックアウトされている限り必ずphenotypeにでる
というのも、完全には正しくなくて、KOしたけどphenotype出ない、なんてことは、よくあります。

あと、
＞交配をさせるごとに、より正常な遺伝子を翻訳するようになる→phenotypeなくなる
については、知らないです。あるかもしれないし、ないかもしれない、とだけ。

お礼

ありがとうございます。
自分の遺伝子改変動物についての知識が幅狭かったことに気づきました…。
トランスジェニックに関しては、導入する遺伝子の種類はもちろん、数や部位によってもphenotypeが変わってくるんですね。

＞genotypingは自分のところでしておくべきですが、もちろん、してますよね。
していません…。やっぱりすべきなんですね。

＞ノックアウトの場合は、変異の入った場所がはっきり分かります
ノックアウトは、ネオマイシンなど入れることで判別が簡単になるって聞いたことがあります。
イメージはあまりできていませんが、ノックアウトがより正確だと言われた意味が分かりました！

＞過剰発現の表現型とKOの表現型が同じだったって話
今の実験にもかかわるので非常に興味あります。
いろいろ考えていこうと思います。

丁寧な語ご説明ありがとうございました！