• ベストアンサー

遺伝子組み換えマウスについて

遺伝子組換えマウス(トランスジェニックマウスおよびノックアウトマウス)の遺伝子型は、どのような方法で調べたらよいのでしょうか?詳しい方よろしくお願いします。

質問者が選んだベストアンサー

  • ベストアンサー
回答No.1

昔はサザンブロットがよく行われていましたが、RIを使わなくてはいけない等の面倒なことがあったため(今はnon-RIでもできますが)、今の主流はPCR法だと思います。マウスの尻尾を少し切ってプロテイナーゼ処理しその後ゲノムDNAを抽出しPCRを行います。そして普通のマウスとのバンドの長さの違いや有無によってノックアウト・トランスジェニックかを判定します。大抵そういったマウス作製時にタイピングしやすいようにターゲットベクターを構築するのが一般的だと思います。また最近はマウスの末梢血から直接ゲノムDNAを簡単に抽出できるキットも発売されているようです。

関連するQ&A

  • 遺伝子改変マウスについて

    趣味で生物学を勉強している者です。最近は様々な遺伝子を潰したり入れたりしているマウスがあるようですが、その名称で混乱している部分があるので質問させていただきます。ノックアウトマウスは特定の遺伝子を欠損させているというのは理解できますが、その逆のノックインマウスとトランスジェニックマウスは両者にどのような違いがあるのでしょうか? よろしくおねがいします。

  • トランスジェニックは交配で導入遺伝子消失?

    現在トランスジェニックマウスを作製して行動を見てます。 でも交配するごとにphenotype(多動性とか)がなくなったように思います! 実際に交配で導入遺伝子がなくなるとかそういう報告はあるのでしょうか? また、ノックアウトマウスだと交配してもなくなることはないと聞きましたがどうなのでしょうか? 教えてください! よろしくお願いします!

  • 遺伝子ターゲティングとトランスジェニックマウスの違い。

    遺伝子ターゲティングとトランスジェニックマウスはそれぞれどんなものか教えて下さい。特に、遺伝子ターゲティングについて詳しくお願いします(作り方など)。そして、あえて違いを言うなら、この二つはどう違うのですか?面倒な内容ですが、宜しくお願いします。

  • 遺伝子組み換えで破壊株を作成するメリットとは?

    よく遺伝子組み換えで特定の遺伝子を破壊したマウス等が見られますが、 遺伝子を破壊する・ノックアウトする、というのは研究等ではどのようなメリットがあるのですか?

  • 遺伝子をノックアウトしたマウスの作り方

    マウスの血中からNH2-Mer-Ala-Pro-Trp-Trp-COOHというペプチドがあったとします。 このペプチドの機能を調べるためにこのペプチドをコードする遺伝子をノックアウトした マウスを作りたい場合どうすればよいでしょうか?

  • ノックアウトマウス作成時の遺伝子型表記方法について

    ノックアウトマウスを実験対象にした論文を読んでいて、 わからない表現方法があったので質問させていただきます。 ノックアウトマウスの作成で、 「Emx1Cre × fγ2/+=γ2 ⁺/⁻mice」と書かれていたのですが、 遺伝子γ2の配列を標的配列とした「Cre-loxP部位特異的組換え」による ヘテロノックアウトマウス作製法であるということはなんとなくわかるのですが、 Emxは一般的なCre-loxP部位特異的組換えで用いられる「GFP」の代わりなんでしょうか? 加えて、fγ2/+というのは遺伝子型であり、γ2がLoxPに挟まれている対立遺伝子と 挟まれていない(野生型)対立遺伝子により構成されているということなんでしょうか? 長々と質問して、申し訳ございません。 よろしくお願いいたします。

  • 遺伝子組み換え技術の破壊株作成法について

    私は実験で細胞性粘菌を使用して特定の遺伝子破壊株を作成しています 方法としては相同組み換えさせるために必要なノックアウトコンストラクト(人工構築物) を作成し、エレクトロポレーション(電気穿孔法)で細胞に導入しています ほかの生物でもノックアウトコンストラクトは使うと思うのですが どうやって組み換えをおこされているのでしょう? マウス等では受精卵にいれて組み替えているんでしょうか? 方法等知っている方、教えてください

  • トランスジェニック動物について

    参考書を読んでも分からなくて困っています。 トランスジェニック動物=遺伝子導入した動物なら、ノックアウトはトランスジェニックとは違うものなのでしょうか? また、ノックアウトした場合、欠損させた遺伝子の分だけDNAは短くなるのでしょうか?(ノックインの場合は長くなりますか?)それとも機能だけを潰しているのでしょうか? 分子生物学初心者です。どなたか教えて下さい。

  • ノックアウトマウスをもちいた

    卒業研究を行っているんですが、 論文にのせるのせないはおいておいて、 これだけはすべきだという実験内容はありますでしょうか? 研究者の方、またはノックアウトマウスを用いた実験を行った方、 お答えください。 ノックアウトする遺伝子などの内容はここでは言えないのですが、形態形成などに関連している遺伝子を利用しています。

  • ノックアウトマウスの作成について

    ノックアウトマウスの作成方法を見ると、 (1)キメラマウスを作成し、 (2)キメラマウスと純系を掛け合わせてヘテロマウスを作成し、 (3)ヘテロマウス同士を掛け合わせて 最終的に目的とする遺伝子を欠損させたマウス(ノックアウト個体)を得るそうですが、 (1)で複数のキメラを作成しておき、(2)の段階でキメラ同士を掛け合わせれば、 同じ1/4の確率で一世代分短縮させてノックアウト個体を得ることが可能かと思ったのですが、そうしないのはどうしてですか? ご存知の方、回答よろしくお願いします。