- 締切済み
アガロースゲル電気泳動
- みんなの回答 （1）
- 専門家の回答
みんなの回答
- owata-www
- ベストアンサー率33% (645/1954)
サンプルバッファー中にグリセロールが入っているために液の粘性が上がるため、逆に入っていないと拡散します
関連するQ&A
- アガロースゲル電気泳動時にサンプルやマーカーが浮いてしまいます。。。
アガロースゲル電気泳動を行ってDNAやPCR産物のバンドを検出する際に、アプライしたサンプルやマーカーが泳動中にゲルから浮き出てしまい、解析できないことがしばしばあります。 dyeはBPBを使用していて、100Vで30分ぐらい泳動していますが、10分ぐらいでゲルに青色のバンドが全く残っていないという現状です。 バッファーは１×TBE,ゲルも１×TBEで１～２％アガロースゲルを通常毎回作成して使用しています。 サンプルの精製度が悪ければ浮いてくるという話は聞いたことがありますが、マーカーも浮いてきてしまうので原因が全くわかりません。 ほかの人は同じマーカーを使用していてもこのような現象はないということです。 ゲルの作成方法に問題があるのかと考えましたが、全くわかりません。 考えられる原因をいろいろと教えていただければ、大変助かります。 どうぞよろしくお願い致します。
- 締切済み
- 化学
- アガロースゲル電気泳動
現在、実験でアガロースゲルを用いて電気泳動を行なっています。 しかし、ポジティブコントロールは毎回バンドがでるのですが、目的とするバンドの方は、帯状にPCR産物が流れた跡のようなものが出るのみで、バンドが出なくなってしまいました。 1ヶ月くらい前まではきちんとバンドが出ていたので、プライマーの設計ミスでもなさそうなのですが、何が原因なのか分からず困っています。 PCRをかける前のDNAは10ng/μLで、実際電気泳動で流しているDNA濃度は測定していないため、分かりません。 ちなみに電気泳動の条件は以下のとおりです。 ・ゲル：1.5%アガロースゲル ・電圧：100V どなたか知恵を貸してください。 実際の電気泳動後の写真は、 http://oshietegoopcrdenkieidou.rakurakuhp.net/ に載せました。 よろしくお願いします。
- 締切済み
- 生物学
- エチジウムブロマイドの添加
DNAのアガロースゲル電気泳動では、一般に、その泳動用緩衝液とゲルにエチジウムブロマイドが含まれているらしいのですが、私は泳動後にエチジウムブロマイド溶液で染色するだけで、緩衝液にもゲルにもエチジウムブロマイドを加えたことがありません。緩衝液やゲルに加えるのには染色以外の目的があるのでしょうか？教えてください！
- ベストアンサー
- 生物学
- アガロースゲル電気泳動で
ちわっす！ 答え魔ぽんたくんでっす♪ 今日は困ったコトがあって、投稿しました。 DNAマーカー（λ/HindIII）を1％アガロースゲルで電気泳動してるんだけど、DNAが高分子の部分でスメア状のバンドを作って上手く分離できません！！ (DNAがすべて、高分子エリアにスメア状バンドとして集まってしまいます) （T_T） 泳動バッファなどの試薬は調製済みのメーカー製プレミックス品を使っているので、試薬の組成は合ってます。 希釈率にもミスはありませんでした。 この場合、どのような原因が考えられますか？ ＜条件＞ ・泳動バッファ（TAEバッファ） ・ゲル（1×TAEバッファでアガロースを溶解した1％ゲル） ・電圧＆時間（50ｖ,90分） ・DNA量（100ng,10ng,3ng,1ng,300pg）
- ベストアンサー
- 生物学
- DNAの電気泳動用バッファーについて
DNAの電気泳動をする時にTAEバッファーとTBEバッファーが良く用いられると聞きましたが、どうやって使い分ければ良いのでしょうか？ ホウ酸が入っているためにTBEの方が緩衝能が強い、TBEの方がシャープなバンドとなる、大きいバンドを見たいときにはTAEの方が良い、とか言われますが理由が良くわかりません。 また、EDTAは何のために入っているのでしょうか？
- ベストアンサー
- 生物学
- 電気泳動をおこなっていたんですが・・・
電気泳動をおこなっていたんですが、ゲルの１２ウェルある中の左半分６個がなかなか泳動されず右半分が早く泳動されて均等な速さで泳動が出来ないんです・・・、原因って何か分かりますか？よろしくお願いします・・・。
- ベストアンサー
- 生物学
- アガロースゲル電気泳動
PCR法で処理したDNAをアガロースゲル電気泳動をしました。 レーン１ DNA分子量マーカー（１Kｂｐ） レーン２～レーン４ PCR産物１ レーン５ DNA分子量マーカー（１００ｂｐ） レーン６～レーン８ PCR産物２ レーン１からレーン４はアプライする時にゲルにさしてしまいました。 レーン５～レーン８はアプライは綺麗にはいりました。 結果はレーン１からレーン４まではバンドが見えたが、レーン５はライトにあてるとやっとなんとか見える程度で、レーン６～レーン８は何も見えなかった。 レーン６からレーン８はPCR産物２を入れ忘れたと考えられるが、レーン５の分子量マーカーがきちんとでなかった理由がわかりません。 どのような理由が考えられるでしょうか？ またアプライするときにゲルにさしてしまったことで、さしてない方に影響出たりはするんでしょうか？
- 締切済み
- 生物学
- 二次元電気泳動について。
二次元電気泳動をやっているのですが、 一次元目のIPGディスクゲルと二次元目のSDS-PAGEゲルとの 接着がうまくいきません。もう少し言うと 接着できるのですが、泳動途中で（４０分位して）はがれてしまいます。 何回やってもうまくいかないので かなりへこんでます。 ちなみにつなぎのゲルは０．５％のアガロースゲルなんですが。 これだけの書き込みでの判断はむずかいしいかとは思いますが よいアドバイスをお待ちしています。
- 締切済み
- 生物学
