- ベストアンサー
マクロファージ細胞培養について★
今、大学の卒業研究で、マクロファージを培養し、増やしているのですが、どうもうまく増やす事ができません。継代するにつれて細胞がなかなか増えなくなってしまったりして、困っています。細胞がいるのかどうかを見分けるのも難しいです。どなたか、基本的な培養方法と何か良いアドバイスがあれば宜しくお願い致します。 ちなみに、ダルベッコＭＥＭ培地を使用しています。
- isasakasann
- お礼率100% (2/2)
- 生物学
- 回答数2
- ありがとう数2
- みんなの回答 （2）
- 専門家の回答
質問者が選んだベストアンサー
- ベストアンサー
DMEMのMEMはMinimal Essential Mediumの略ですから、 DMEMだけで育つ細胞はそんなに多くないです。 とりあえず、#1様の仰る通りラボ内の先輩や指導教官の方に聞かれる事をお勧めします。
その他の回答 (1)
- MIYD
- ベストアンサー率44% (405/905)
ラボの先輩のやり方を見るのが一番だと思いますが、 ラボ内に同じ細胞を使ったことのある先輩はいないのでしょうか。
お礼
ご返信有難うございました★★頑張ります★
関連するQ&A
- 細胞培養実験でのコンタミ
細胞培養実験でのコンタミ にできるだけ早く気づくために、日ごろどのように管理すればよいか、 具体的な方法を教えてください。 また、何回か継代している細胞で、もしコンタミしていたとしたら、 原因は”直近”の継代や培地がえでの操作や培養液にある確率が高いと思いますが、 場合によっては、１つ前の継代時の操作ミスなどが原因である可能性もありますか？
- 締切済み
- 生物学
- 細胞培養（継代）について教えて下さい。
細胞培養（継代）について教えて下さい。 細胞数のカウントの仕方がわかりません。 ”わかりやすく”教えていただけるとうれしいです！ 例えば・・ 元の培地の細胞数・・25×10・4/ml だとします。 これを”1×10・5/ml”になるように蒔くためには 10mlの培地に何μlを蒔けば良いのでしょうか。 お恥ずかしいことに、この何乗というのが苦手で（涙） 考えていたらどんどんややこしくなってきてしまいました。 初歩的なことですみません、宜しくお願いします！
- ベストアンサー
- 生物学
- 293細胞の培養方法について
先々週に293細胞を起こしましたが（ストックは１年半ほど前のもの）、なかなか増えてくれません。ほとんんどの細胞が浮いていて、接着している細胞も塊のようになっている状態です。どなたか293細胞を使用したことがある方、培養のコツのようなものがありましたら教えてください。よろしくお願いします。 培地はDMEM（high glucose）、継代の時はPBS-EDTAを使用し、37℃,5% CO2のインキュベーターで培養しています。
- 締切済み
- 生物学
- 細胞培養とウイルス培養に関して。
もの凄い初歩的な質問でしたら、申し訳ありません。 タイトルにもありますが、細胞培養とウイルス培養って何が違うのでしょうか？ 私なりの解釈だと、 細胞培養は、寒天培地などの人工培地に、細胞液？を添加して培養するのに対して、 ウイルス培養は、ウイルスを何かの細胞に組み込んで、それを培養するという解釈ですが、どうなんでしょうか？ また、細胞培養、ウイルス培養ともに培養ですが、使用器具や操作方法などに違いはあるのでしょうか？ 回答いただけるととても助かります。 よろしくお願いします。
- ベストアンサー
- 生物学
- 細胞培養について
細胞の増殖が悪く困っています。 細胞はRBL-2H3(ラット好塩基球白血病細胞)細胞株で、付着性の細胞です。 培地にはMEM培地（10％）を使っています。 培養条件は37℃で5％CO2、25cm2の細胞培養用フラスコに培地5mLで育てています。 凍結保存していた株を先月新しく起こしたところ増殖が悪く、何度起こし直しても改善されず困っています。 春から夏にかけて同じLotの株を起こして培養していた時には問題なく増殖が見られたのですが・・・ 具体的には。 通常は播種から３～４日でコンフルエントになるのですが、現状では１週間経ってもコンフルエントには遠い状況です。 播種から２日目までは比較的正常のペースで増殖しているように見えるのですが、それ以降にほとんど増えなくなってしまうのです。 また最近では、細胞内に今まで見られなかった空胞を持つ個体が多く観察されるようになり、関連があるのではと疑っています。 これまでに、対策として培地の作り直し、インキュベーターの清掃等を試みましたが、効果が見られません。 何かアドバイスやヒントになりそうなことだけでも構いませんので、助言を下さいm(u＿u;)m
- ベストアンサー
- 生物学
- 接着性の細胞培養が上手く行きません
接着性の細胞培養が上手く行きません こんにちわ。初めて投稿します。私は大学の研究室で接着性の細胞（ＲＢＬ－２Ｈ３ ラットガン好塩基球細胞）の培養をおこなっているのですが、本来フラスコに接着するはずの細胞が剥がれて培養液中に浮遊する減少が相次いで困っています。 培地は10%FCSを含んだＤＭＥＭ培地（抗生物質：カナマイシン硫酸塩含む） 培養はＴ２５ｃｍ２フラスコで３７℃、５％ＣＯ２インキュベーターで行っています。 実験に使用しているチップは定期的にオートクレーブで滅菌していますし、培地を入れるメディウムびんも滅菌してちゃんとフィルターろ過も行っています。 細胞培養をはじめてから約３ヶ月で、以前は上手くいっていたのですがここ２週前から突然細胞の接着が起きないようになってしまいました。初めは細胞を起こした期間が長かったことが原因と考えて新しい細胞を起こしてみたのですが一向に改善されずに困っています。 一応培地は7.5%NaHCO3で赤～赤味を帯びたオレンジ色にまでｐＨをあわせてみたのですが、培地に何か問題があるのでしょうか？回答の程をお願いいたします。
- 締切済み
- 生物学
- 細胞数のカウント（継代培養）について教えて下さい。
細胞数のカウント（継代培養）について教えて下さい。 継代培養を引き継ぎ、最近業務を始めたところです。 その時はわかったはずなのに、メモを見ても思い出せません。 メモは以下のとおりです。 8×10^4/mlを“10mlの培地に1×10^4/mlになるように”継代する場合。 1÷8＝0,125 0,125×1,000＝125μl 以上ですが、最後の×1,000の意味がわかりません。 他も何か違っていたら教えて下さい。 濃度計算がもともと苦手で、お恥ずかしいですが 詳しく解説していただけると助かります。 よろしくお願いします！
- ベストアンサー
- 生物学
- 髄膜炎菌(N.meningitidis)の継代培養について教えて下さい
大学の微生物学の実習で、各自で菌の同定をします。 そのために使う予定の培地を申請しなければならないのですが、もし髄膜炎菌に当たった場合に、継代培養でどの培地を使用するのか分からず困っています。 チョコレート寒天平板で継代培養は行えますか？ また、継代培養は3日に1回行えばいいでしょうか？ 教えて下さい。よろしくお願いします。
- 締切済み
- 生物学
お礼
有難うございました★なんとかなりそうです★頑張ります★