SDS PAGEで使うサンプルの調整試薬について

質問

SDS PAGEをするまえにサンプルを処理するバッファーについて質問です。トリス緩衝生理食塩水（Tris-Buffered Saline）を作りたいのですが、組成は10mM Tris(MW=121,14)、100mM NaCl(58,44)。100ml作るには、Tris 1mmol×121,14=121,14mg、NaCl　10mmol×58,44=584,4mg を量って、溶媒（水）に溶かして全量100mlにすればいいのでしょうか？それとも、10mM Tris１L,100mM NaCl １Lをそれぞれ作って50mlずつ混ぜ合わせて作るのでしょうか？どちらが正しいのか、もしくは別の方法があるのか教えてください。よろしくお願いします。

回答No.1

cilantro

後者だと最終濃度は5mM Tris, 50mM NaClになってしまいますね。
基本的には前者でOKだと思いますが、指定のpHが決まっていれば80ml程度の水で溶解してから塩酸でpHをあわせて100mlにメスアップします。

今後も頻繁に使用するのであれば1Mの濃度でTris溶液をpHを調整して作製しておき、本溶液1mlとNaClと水とで必要分だけ要る時に調製することも可能です。希釈で若干pHが変化しますが、SDS-PAGEであればほとんど影響はないでしょう。

お礼

回答ありがとうございます！pHも７，４と決まっているのでcilantroさんのご回答通りに試薬を作ってみたいと思います。とても参考になります♪ありがとうございました！