株化乳癌細胞について

質問

株化乳癌細胞のMCF-7について質問です。
シャーレに播くと24～48時間たっても浮いてしまう細胞が多いです。
アッセイに使用する前に培地交換しても、新たに培地を加えることでまた浮いてしまいます。
この細胞にとっては普通のことなのでしょうか？
どなたかご存知の方、どうぞよろしくお願いいたします。

回答No.2

ponroom · ベストアンサー

#1の者です。
細胞によって扱いは結構違ってきますね。
適当に継代を行っても中々死なない細胞もありますし、
結構慎重にやらないと駄目な細胞もありますので。
「1：3～4位で週1回ペース」の部分の意味がよく分かりませんが、
継代のタイミングは70～80％コンフルエンスの状態で行うのが良いとされています。
継代にかかる時間はどの程度でしょうか？
それから血清は問題ないでしょうか？
使っている血清によっては細胞が死んでいく物がありますので。
血清を買う場合は色々な種類の物を試してみて、
細胞の状態の良い物を大量にまとめ買いする事が多いです。
同じ細胞を扱っている人はいますか？
居るならその人が問題なく実験ができているのか気になります。

回答No.1

ponroom

継代が上手くいかず、細胞が死んでいるって事はありませんか？
浮遊細胞でなければ浮いている細胞は死んでいますので。
培地の組成やpHは最適化されているのでしょうか？
それからはがれ易い細胞もありますので、
慎重に培地交換をされた方が良いと思います。
私は一旦ディッシュ（シャーレ）の壁に
ゆっくり出しながら行っています。

お礼

ありがとうございます。
それぞれの細胞でやはり違うものなのでしょうか・・・。
継代の時点では増殖は遅いですが1：3～4位で週1回ペースで継代できています。
多少の剥がれはみられます。
でもアッセイするため細胞数を数えてシャーレに播くと、
それ以上に剥がれが目立ってしまいます。
特におかしなことはしていないと思うのですが。。。