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※ ChatGPTを利用し、要約された質問です（原文：大腸菌の形質転換(lacオペロン)について）
大腸菌の形質転換(lacオペロン)について
このQ&Aのポイント
- 大腸菌の形質転換(lacオペロン)の実験で、ラクトースやIPTGの有無にも関係なく、lacZ活性を示した遺伝子型の異なる二つの大腸菌に対して、lacIをプラスミドベクターにのせ導入することによって、lacZ活性が見られるかどうかを調査しました。
- ONPGやX-Galは、lacZ活性の評価によく使われる物質で、ONPGはONPを生成し、X-Galは青色を示すガラクトシドを生成します。今回の形質転換の評価にはX-Galを使用した理由としては、ONPGよりもX-Galの利点があるためです。
- ラクトースオペロンの発現機構を確かめる実験の方法については、生化学の参考書には基礎的な情報が掲載されていることが多く、実験法まで詳しく解説しているものは少ないです。しかし、ラクトースオペロンに関する情報や実験の方法を詳しく説明しているウェブサイトや専門書が存在しますので、それらを参考にすると良いでしょう。
noname#10018
- 生物学
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質問者が選んだベストアンサー
ONPGは、発色の前後とも可溶性です。 ですから、液中で活性を測定（定量）するには適しています。 X-Galの発色基は、反応後、水に不溶性です。したがって、コロニーの周りが発色し、その色が拡散していかない利点があるため、コロニーでのLacZ活性の定性的な検出には、通常X-Galが用いられます。 あと、ONPGで活性を測定するときは、予め菌体をトルエンか何かで処理して、細胞膜を透化しやすくしてからやりませんでしたか？ ひょっとすると、ONPGに比べて、X-Galは膜を通りやすい（取り込まれる）のかも知れません。それで、生細胞で評価したいときにはX-Galなのかも。 ラクトースオペロンの発現機構を確かめる実験の方法ですが、論文を読まれるしかないのではないかと思います。 （基礎的な「分かっていること」を見るだけの実験でないなら） 下記URLから検索してみるといいでしょう。 逆に、分かっていることを確かめる「学生実験」的なものなら、 ラクトースオペロン 実験 というキーワードで、goo, google等で検索してみてください。いくつか引っかかります。
お礼
お返事が遅れて大変申し訳ありません！ 確かに行った実験では、ONPGによる活性測定前にトルエンで細胞膜を脆弱化させ、X-Galによる測定ではトルエン処理は行いませんでした…迂闊でした（＾＾； lacオペロンは基本的過ぎてncbiで検索しても無いのかなと思ってましたが…これからでも調べてみようかなと思います★