大腸菌の形質転換の実験について

質問

大学生です。
現在、大腸菌に形質転換を行い、その組み替えたDNAの種類を見分ける実験をしています。プラスミドDNAには、アンピシリン耐性の遺伝子と、ラクトースオペロンＺの遺伝子が組み込まれています。

そこで、気になった事について質問したいです。

まず、形質転換した大腸菌を培養したのですが、そのコロニーについて

○どうしてコロニーは丸形なのでしょうか？
○たまにひょうたん形をしたコロニーがいますが、なぜでしょうか？
○また、そのコロニーを楊枝でつつき、LB培地で培養したのですが、
つついた楊枝にはどれ位の大腸菌がついているのでしょうか？
○大腸菌を旋回培養する際、目(目はないが)がまわらないのでしょうか？
○そもそも、LB培地の役割は何なのか
○組み替え率と形質転換率を調べるには、なんの数値を参考にしたらよいのか

質問が多くて申しわけありません。調べてもわからなかったので、よろしくお願いします。

回答No.1

Kutedh578

パッと答えられるのだけお答えしますね。

○どうしてコロニーは丸形なのでしょうか？

形についてあまり考えたことがありませんでした 笑。まず、一つのコロニーは1細胞由来です。アンピシリン耐性を持った一つの大腸菌が2倍ずつ増えていくわけです。最も増えやすい形が丸型なのではないでしょうか。

○たまにひょうたん形をしたコロニーがいますが、なぜでしょうか？

２つのコロニーが増えるうちに繋がっただけです。

⚪︎つついた楊枝にはどれ位の大腸菌がついているのでしょうか？

その人のさじ加減です 笑。もしちゃんと知りたいなら計算しましょう。

○大腸菌を旋回培養する際、目(目はないが)がまわらないのでしょうか？

面白い発想ですね。それは人だからそう思うだけです。大腸菌からすれば空気たくさん含まれてラッキー♪って感じでは。

○そもそも、LB培地の役割は何なのか

大腸菌だって栄養が必要です。

○組み替え率と形質転換率を調べるには、なんの数値を参考にしたらよいのか

忘れました。
ノートとか実験プロトコル見直してみては。