• 締切済み

酸変性後のIgGの中和能に関して

どなたか詳しい方がいらっしゃいましたら教えてください。 ハイブリドーマにてモノクローナル抗体を作製し、その上清では標的分子の中和能を確認しています。その後、酸処理にて抽出した場合に変性が起こりうるとは思うのですが、その中和能が圧倒的に上昇する可能性は考えられるでしょうか？

みんなの回答

  • ga111
  • ベストアンサー率26% (247/916)
回答No.1

酸処理にて抽出した場合？が意味不明ですけど、抗原をつかった精製その他の精製で酸処理にて抽出したということ？ もしそうならあります。酸の中和、標的分子の中和能、ちょっと判りにくいですけど、標的分子の抗原性の中和能ということならば。一般にやられることです。

  1. カテゴリ
  2. 学問・教育
  3. 自然科学
  4. 生物学

関連するQ&A

  • 分子標的薬　分子標的治療薬

    分子標的薬は小分子化合物とモノクローナル抗体に分けられるらしいのですが、小分子化合物とな何でしょうか？

  • 免疫染色の原理について

    免疫染色の原理について 仕事で、免疫染色をすることになりました。 文献で調べてみたところ、プロトコルは手に入りましたが、いくつか原理が分からないところがありました。 ・ブロッキングについて 1次抗体を反応させる前に、他種の血清を切片にかけて、標的タンパク以外のタンパクをブロックして、非特異反応を防ぐ、とのことですが、そもそもなぜ他種の血清をかけるとブロッキングになるのでしょうか？ 抗体の非特異反応とは、標的タンパクのエピトープに似た分子構造を持つタンパクが他にあればそこに抗体が結合してしまう反応と解釈しているのですが、他種血清をかけることで標的以外のタンパクがブロックされるという原理が分からないです。 例えばヒトの口内粘膜上のTLRを抗ヒトTLRマウスモノクローナルIgGを1次抗体として染めるとして、この試料を、例えばカエル血清で処理するとなぜ、非特異反応を防げるのでしょうか？ カエル血清に、ヒトTLRと1次抗体の結合だけを保護し、TLRに類似するエピトープを持つタンパクと抗体の反応を抑制するなどというピンポイントな機能があるとは思えないないです。 実際にはTLR以外を染める場合でもカエル血清は有効とのことですし（カエルでなくてもヒトと類似するタンパクを持っていない生物の血清であればいいそうですが）。 ・試料を過酸化水素水で処理する理由 DAB法ではDABと過酸化水素とHRPで標識した2次抗体を発色しますが、この反応の非特異的な発色を防ぐために、試料中のもともとあったペルオキシダーゼを失活するために過剰な過酸化水素水で試料を処理するとありました。 ペルオキシダーゼはミトコンドリアの水素伝達系で生じた過酸化水素やフリーラジカルを分解する酵素とのことですが、過酸化水素を分解する酵素が、過酸化水素で失活するものなのでしょうか？過剰であれば壊れるのでしょうか？ 酵素は反応を促進させるものであって酵素自体は反応の際に構造は変化しないと記憶しているのですが。 また、過酸化水素は有機系の高分子を破壊するものと思っていましたが、標的タンパクを変性させる可能性はないのでしょうか？ 知識がないもので、的外れなことや間違ったことを書いているかもしれませんが、よろしくお願いします。

  • ＲＮＡワクチンの発現分子機序について

    アメリカなどのメッセンジャーＲＮＡワクチンのニュースで中和抗体ができたとか、ワクチン開発が成功したと聞きますが、調べたところ、元のＲＮＡは新型コロナウイルスの受容体結合ドメインの一部で変異の少ない箇所を何か所か選ぶはずです。この部分が何らかの変異なり翻訳後修飾変化すると感染性がなくなるからです。このＲＮＡの断片は今のバイオテクノロジーで作成できますが、その後は、高分子ミセルと免疫賦活作用のあるＲＮＡ情報を追加して血液中に投入すると考えました。その後、高分子ミセルに標的抗原をつけて体内の標的細胞を選択してるのか選択していないのか分かりませんが、細胞内にエンドサイトーシスで侵入後に高分子ミセルは分解してｍＲＮＡを細胞に放出するところまでは分かりました。しかし、その後の、翻訳因子の発動とペプチドの発現に至る過程が今の科学で詳しく分かっていないはずです。なぜ、タンパク質が発現して抗体が確認できるのでしょうか？もし、仮設でも分かる人がいれば教えてください。

  • 酸中和剤

    胃腸薬の成分で「酸中和剤」とはどのような(名称)成分なんでしょう？ また 「酸中和剤」が多く含まれている胃腸薬の名称がわかりましたら ヒントだけでも構わないのでお願いします。

  • ゲノムDNAの質の検定の為の、アルカリアガロースゲル電気泳動

    抽出したゲノムＤＮＡの質の検定を行いたいと思い、アルカリアガロースゲル電気泳動について調べています。 『バイオ実験イラストレイテッド　第二巻』の123ページにはこう書かれています。 “(中略)高品位のゲノムライブラリーの作製などの特殊な用途には、調製したＤＮＡにできるだけニックが入っていない事が望ましい。これを検定するには、ＤＮＡを変性した状態で平均鎖長を調べればよい。ここではそのための、アルカリアガロースによる変性条件下でのＤＮＡの電気泳動法について解説する” ここで不思議に思ったのですが、ＤＮＡを95℃で熱変性→4℃急冷→1本鎖DNAにした状態で、普通にアガロースゲル電気泳動を行えば同様の結果(効果)が得られるのでないか？ わざわざアルカリアガロースゲルで泳動する必要があるのだろうか？と思うのです。 電気泳動中は泳動バッファーの温度も上昇していきます。中性アガロースゲル電気泳動ではそれによって泳動中に1本鎖DNAが再結合しまうから、アルカリ条件下で再結合を阻害しつつ泳動するのだ、という事なのでしょうか。 どなたが宜しくお願い致します。

  • 卵の酸変性について

    レモンカードって卵の酸変性も関与していると考えていいのでしょうか？

  • pSectag2B　を用いたベクター構築と組み替え蛋白質を用いた抗体作成

    現在pSectag2B発現ベクターを用いた組換え蛋白質の発現ベクターを構築しようとています。 (http://www.invitrogen.co.jp/catalogue/invitrogen/V900-20_001.shtml) 現在プライマーの構築を行っている段階ですが、どの制限酵素サイトをつけるかを考えています。 ＭＣＳの中央のあたりでつなげなければ(たとえばpSectag2BでいえばBamHIとXhoIの組み合わせ)、 N末C末両端に余計なアミノ酸残基が引っ付いてきてしまうと思います。 また、Histagとのリンカー部位も入ってきてしまいますので、生理活性に影響が出ないか少々心配なところです。 ORFの上流はできる限りシグナル配列の直下につなげたほうが良いのでしょうか？ また、リンカー配列もできるだけ短くしたほうが生理活性に影響が出る可能性は少ないのでしょうか？ さらに、上記の方法で作成した組換え蛋白質(仮に蛋白質Aとしておきます)を抗原としてマウスモノクローナル抗体(中和抗体)を作成しようと考えています。 抗原がマウスのもつその蛋白質Ａとホモロジーが非常に高いため、リンカー配列などを認識してしまうのではないかと考えています。 ホモロジーの高い抗原を用いて抗体を作成するのはやはり難しいのでしょうか？ ラビットのポリクロ抗体でも作ったほうがいいのでしょうか？ 念のため類似した質問がないか確認はしましたが、重複していたらすみません。 色々とあつかましい質問ですが、よろしくお願いいたします。

  • どうしてアルカリは酸を中和するの？

    どうしてアルカリは酸を中和するんでしょうか

  • 酸と塩基の中和について

    危険物取扱者試験の勉強をしていますが化学でつまずいています。 【問題】 『80gのNaOHを水に溶かして1Lの水溶液にする。 　この溶液10mLを濃度不明の酸で中和したら25mL要した。 　この酸の規定度はいくつか。原子量はNa＝23、O＝16、H＝1』 【答え】 『0.8規定』 HaOHの分子量は40なので80gでは2molで濃度は2mol/L、つまり 濃度2mol/Lの1価の塩基HaOHの溶液10mLを25mLの酸で中和することはわかりました。 『塩基の(濃度×価数×体積)＝酸の(濃度×価数×体積)』 で解こうとしても酸の濃度と価数がわからないので答えが出てきません。 解き方を教えて下さい。お願いします。

  • 虫歯は酸を中和すれば防げますか

    虫歯は糖から作られる酸によって脱灰することが原因ならば、この酸を中和すれば予防できるのでしょうか。現在までそのような方法が普及していないところを見ると何か中和ができない理由があるのだと思いますが、実際はどうなのでしょうか。

注目のQ&A

カテゴリ

専門家に質問してみよう

職業から探して質問する

あなたにピッタリな商品が見つかる！ OKWAVEセレクト

質問する