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SDS-PAGEでタンパク質量を測定する方法とは?
kgu-2の回答
>1レーンあたりにあなたがアプライしたフィブリノーゲンの量 「使用したサンプル量は10μL」を電気泳動したのなら、この中に含まれている量です。サンプルの濃度が分れば、単純な掛算です。こんな中学生レベルの問題とは思えないのですが。 >分子マーカー、還元サンプル、非還元サンプルをそれぞれ8μLずつ用いました。 この意味がよく分からない。なぜ還元サンプルと非還元サンプルが出てくるのか、説明できますか。 なにより、目的が不明。SDSを添加しているので、サブユニットの分子量を求めるのなら、二つのタンパクを混ぜるのは間違いです。実験(正解が分かっているのは、私は実験とは言わず実習と説明しています)での目的、具体的な操作を正確に書かないと、私には判断できません。 また、検量線は、物質の濃度や量を計算するときに利用します。この場合は、Rfと分子量の関係を示した図、でしょうから検量線と書かれると回答者は混乱します。 というのも、タンパクのバンドの濃さから、デンシトメータを使えば、バンドのタンパク量を検量線によって計算できるからです。「1レーンあたりにあなたが・・・」という問いも、レーン当たりのタンパクを計算させても意味がなく、デンシトメータを使ってRf値を出したのなら、「1バンドあたりの蛋白量をいくらか計算せよ」の方が、問題としては適切です。 ただアプライした蛋白量が分かれば、バンドの濃さを比例配分すれば、各バンドの蛋白量は計算できます。 質問は、サブユニットの分子量を求めるのには不要で、目的とは離れているので、理解困難です。実習時の応用問題なのでしょうか。 目的と操作を確認してください。
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