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SDS-PAGEでのミス

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お礼率 43% (68/155)

 初学者です。
 
 ゲル板をセットした状態で
 ゲル穴にマーカー、サンプルをアプライしました。

 それから泳動バッファを注いだのですが
 電気泳動したあと染色してみると
 明らかに隣のゲルにマーカーが入ってるバンドでした。
 せっかくのサンプルは全く見えません。
 3件となりまで影響がありました。

 また、アプライは10μl加えましたが
 そのとき、すっと液がしたへ行った手ごたえが少なかったです。

 また、100ngのタンパク量がサンプル中に入るように計算して
 銀染色を行いましたが、きっちり見えたのは6つのうち1つだけ
 でした。
 
 これは希釈がへたということなのでしょうか??

 具体的に皆様などうされているかお教えください。

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ベストアンサー率 33% (645/1954)

普通は泳動バッファを注いだ後にサンプルをアプライします そうしないと泳動バッファを注ぐ時にサンプルが拡散してしまうので

また、Loading bufferの調整は大丈夫でしょうか?glycerolなどを加えておかないとロードする時にサンプルが拡散してしまい、きちんとアプライできません


おそらく、この2点が原因でサンプルがきちんとウェルにアプライされてなかったのではないでしょうか
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