タンパク定量とSDS-PAGEについて

質問

タンパクを大腸菌で調製した後、SDS-PAGEで確認し、タンパク定量を行っています。
SDS-PAGEで見る限り、そこまで収量があるようには見えないのですが、タンパク定量をすると、かなりの収量がある結果になります。
そういうことはあるのでしょうか？？

検量線はBSAです。

よろしくお願いします。

回答No.3

dolphino

もしかして、大腸菌を壊す時にリゾチームを使っていて、電気泳動ではリゾチームが流れ去るところまで流している、ということはありませんか？
BPBがゲルの端に残っている程度ならこの問題はありませんので気にしないで下さい。

回答No.2

ga111

蛋白溶液に、なにか定量をかくらんするものが入っているかもしれません。また精製した蛋白全体にバックグランドとして蛋白がはいっていると、それが見えないため定量に影響を与えます。

私は、BSAも電気泳動して、バンドの濃さで定量します。

回答No.1

owata-www

まあ、色々原因は考えられますが…

一番考えられるのは、tubeの壁に吸着したとか、沈澱したとかでサンプルをロードする時にロスってることですかね。