- 締切済み
種子を発芽させるには
大学でシロイヌナズナの変異株を育てたいのですが、 種子が古いせいか、発芽しません。 GM培地上に種子滅菌した種子を播種します。 2日間、4℃の冷蔵庫で遮光した後、22℃のインキュベーターに 移しました。もう半月経つのですが、発芽しません。 他の種子は発芽したのですが、1種類だけ発芽しません。 現在、考えてることは、(1)GAを処理する。(2)ブラシノステロイドを処理する。(3)両方処理する。です。 ジベレリンやブラシノを種子に処理する方法が分かりません。 ブラシノのような構造が複雑な物質は、何に溶かして どのように処理すればいいのでしょうか。 論文検索で調べたのですが、見つかりませんでした。 詳しい方、教えて下さい。 お願いします。
- syuutai234
- お礼率71% (10/14)
- 生物学
- 回答数2
- ありがとう数1
- みんなの回答 （2）
- 専門家の回答
みんなの回答
- Ligandable
- ベストアンサー率64% (365/570)
＃１です 一部訂正 シロイヌナズナは光発芽種子ですので，光が当たります。 ↓ シロイヌナズナは光発芽種子ですので，赤色光が必要です。
- Ligandable
- ベストアンサー率64% (365/570)
念のためですが， インキュベーターの光条件はいかがですか？ 一般の施設ではあり得ませんが，うちのように 孵卵器（それでも元祖インキュベーター）ですと， 光が当たりません。 シロイヌナズナは光発芽種子ですので，光が当たります。 おなじ光発芽種子のレタスだと，種類にもよりますが， 20度以下では光発芽感受性が消えるとあったような気が します。温度も如何でしょうか。 おっと，ご質問の趣旨がちがいました。 ブラシノステロイドは水に難溶で。少量(数滴)の有機溶媒で完全に 溶解させ透明になってから規定濃度となるように水と混ぜ添加して ください。 有機溶媒としては低級脂肪アルコールのメタ，エタ，プロパ 低級エーテルのジメチルエーテルか ジエチルエーテル 低級ケトンのメチルイソブチルケトンやメチルエチルケトン でしょうか。ビンボな当方はプロパノール流用です。定性でいいし・・・
関連するQ&A
- タデ種子の発芽について
タデの種子を播いたのですが発芽しません。播種する前は1年ほど4℃で冷蔵保存し、播種後は25-30℃の温室内に置いています。その他、種子を湿った土壌に混和し4℃で1ヶ月間放置後、播種したりもしましたがうまくいきませんでした。タデ種子の発芽で良い方法を御存知の方がいらっしゃれば教えて頂けないでしょうか？よろしくお願いします。
- ベストアンサー
- 生物学
- コマクサの発芽について
大学の卒業研究でコマクサの種子を扱うことにしました。研究室で実験に用いるコマクサを発芽させたいのですが、今まで私の研究室では発芽に成功したことがありません。どなたか適切な前処理法と発芽法をご存知の方がいらっしゃれば、教えてください。 使用するのは八ヶ岳横岳～硫黄岳で2004年に採取した種子(乾燥したものと4℃で冷湿処理したもの)です。よろしくお願いします。
- 締切済み
- 生物学
- 播種前に『種子を煮る』って本当ですか？
エニシダの発芽率を高める為に 種子を80℃の温水で12～24時間温めるとありました。 これは、『定温設定のできる電気鍋で煮る』状態ですが、 入手した種子が少ないので心配です。 正しい処理でしょうか？
- ベストアンサー
- 農学
- 細胞培養について
細胞の増殖が悪く困っています。 細胞はRBL-2H3(ラット好塩基球白血病細胞)細胞株で、付着性の細胞です。 培地にはMEM培地（10％）を使っています。 培養条件は37℃で5％CO2、25cm2の細胞培養用フラスコに培地5mLで育てています。 凍結保存していた株を先月新しく起こしたところ増殖が悪く、何度起こし直しても改善されず困っています。 春から夏にかけて同じLotの株を起こして培養していた時には問題なく増殖が見られたのですが・・・ 具体的には。 通常は播種から３～４日でコンフルエントになるのですが、現状では１週間経ってもコンフルエントには遠い状況です。 播種から２日目までは比較的正常のペースで増殖しているように見えるのですが、それ以降にほとんど増えなくなってしまうのです。 また最近では、細胞内に今まで見られなかった空胞を持つ個体が多く観察されるようになり、関連があるのではと疑っています。 これまでに、対策として培地の作り直し、インキュベーターの清掃等を試みましたが、効果が見られません。 何かアドバイスやヒントになりそうなことだけでも構いませんので、助言を下さいm(u＿u;)m
- ベストアンサー
- 生物学
- 接着性の細胞培養が上手く行きません
接着性の細胞培養が上手く行きません こんにちわ。初めて投稿します。私は大学の研究室で接着性の細胞（ＲＢＬ－２Ｈ３ ラットガン好塩基球細胞）の培養をおこなっているのですが、本来フラスコに接着するはずの細胞が剥がれて培養液中に浮遊する減少が相次いで困っています。 培地は10%FCSを含んだＤＭＥＭ培地（抗生物質：カナマイシン硫酸塩含む） 培養はＴ２５ｃｍ２フラスコで３７℃、５％ＣＯ２インキュベーターで行っています。 実験に使用しているチップは定期的にオートクレーブで滅菌していますし、培地を入れるメディウムびんも滅菌してちゃんとフィルターろ過も行っています。 細胞培養をはじめてから約３ヶ月で、以前は上手くいっていたのですがここ２週前から突然細胞の接着が起きないようになってしまいました。初めは細胞を起こした期間が長かったことが原因と考えて新しい細胞を起こしてみたのですが一向に改善されずに困っています。 一応培地は7.5%NaHCO3で赤～赤味を帯びたオレンジ色にまでｐＨをあわせてみたのですが、培地に何か問題があるのでしょうか？回答の程をお願いいたします。
- 締切済み
- 生物学
- 種子のでき方と発芽について教えてください
毎年数千本の花の苗を種子から育て、皆さんにも配布しています 所が、前年咲いた花から自家採取した種子の発芽率が大変悪化しています 例えば、スイトピーでは、新規購入した種子は殆ど発芽しましたが 前年自家採取した種子（新規購入した種子よりも大きく充実している）の方は 全滅でした（播種方法は同一です） そこで質問ですがーーーーー (1)受粉しないと種子は出来ないのですか？ (2)受粉しないでも種子は出来るが、受粉していない為に発芽はしないのですか？ ＊近年、私の花壇周辺でもミツバチ・蝶が飛来する数が激減していますので その影響かとも思うのですがーーーー ＊実は昨年は自家採取のスイトピーは捨てるほど発芽したのですがーーー よろしくお願いします
- ベストアンサー
- 園芸・ガーデニング・観葉植物
- 大腸菌の形質転換を利用したクローニング
先日実験で、大腸菌の形質転換を利用したクローニングを行いました。 集菌と科学的処理 (1)大腸菌の培養液を氷上で冷却した。 (2)培養液5 mLを遠沈管に移し、3000 rpmで5分間遠心した。 (3)大腸菌のペレットを崩さないように上側にして、培養液の上澄みをデカントして捨てた。 (4)あらかじめ冷やしておいた形質転換用溶液（TSS）500 nLにDMSOを25 nL入れて、混ぜた。 (5)(4)を500 nL加えた。 (6)ボルテックスで穏やかに撹拌して、ペレットを縣濁した。 (7)懸濁液を100 nLずつエッペン管に分注して、形質転換に用いた。 (8)ライゲーション反応のDNA溶液を5 nL加えて、指先で軽く撹拌した。 (9)氷上に14:05～14:25頃まで放置して、DNAを取り込ませた。 寒天培地への植え継ぎ (1)DNAを取り込ませた大腸菌に500 nLのLB培地を加えた。 (2)37℃で15～60分インキュベートして、抗生物質耐性遺伝子が活性化するのを待った。 (3)別の遠沈管に大腸菌を50 nL移し、BL培地を250 nL加えかさあげした。 (4)それぞれの遠沈管に40 nLの100 mM IPTGと40 nLの40/mL X-galを加え、軽く撹拌した。 (5)100 ng/mLのアンピシリンを含むLB寒天培地2枚に、それぞれの遠沈管の大腸菌を撒いた。 (6)滅菌したスプレッダーで水気がなくなるまで満遍なく広げた。 (7)37℃の気相インキュベーターに入れて、一晩放置した。 このような手順で実験を行ったのですが、全くコロニーが出来ませんでした。 なぜでしょうか？ よろしくお願いしますm(__)m
- ベストアンサー
- 生物学
- オオナルコユリの種子からの発芽
オオナルコユリを発芽させるために種子を採取していますが、今年の猛暑で、果実が未熟で硬いまま茎が枯れています。例年は１０月上旬に種子を採取するまで茎は枯れません。この状態の果実を採取して常温放置し、自然に熟したものでも発芽できるでしょうか。果実の直径は７～８ｍｍに達しており正常な大きさです。
- ベストアンサー
- 農学
