GPCカラムの異常？

質問

GPCカラムで分析中に，後半に測定した試料のクロマトグラムで，tr=10のピークだけが異常に大きく検出されました．翌日，標準試料を測定してもtr=10のみが大きく検出されました．水で洗浄しても，標準試料のtr=10のみが大きく検出されます．移動相のみではピークは検出されません．圧力異常や液漏れはありません．GPCカラムでの分析で，tr=10のみが異常に大きく検出される原因は何でしょうか．ご助言を宜しくお願いいたします．

回答No.4

c80s3xxx

ついでに．
そもそも，今の条件の排除限界は rt にしてどのくらいなんですか？

回答No.3

c80s3xxx

インジェクタの汚れではなさそうということですか？

そもそも，tr=10 のみが大きくなる，という説明自体がよくわからない状況です．
ブロードな分子量分布をもつような試料を打つとか，ポリスチレンスルホン酸(ものはなんでもいいですが)みたいな分子量標準を打ってみて，どうなるかをちゃんと説明してもらわないと．

たとえば，非常に広い分子量分布をもつような試料なら，本来なら幅広のブロードな，そう，たとえて言えば，角の丸い台形のようになるはずが， tr=10 のところだけ盛り上がるとか？

回答No.2

c80s3xxx

「溶離液」を「インジェクト」したらどうなります？
まっさきに疑うのは，#1にも書いたけど，インジェクタの汚染ですが．

補足

c80s3xxx様
ご回答有難うございます．

溶離液のみをインジェクトしてもピークは検出されませんでした．
その後，再びポリマー試料をインジェクトするとやはり溶出時間10分のピークのみ大きく検出されました・・・

カラム充填剤が変質したのでしょうか...

回答No.1

c80s3xxx

tr=10 なんて情報になってないでしょう．
カラムのタイプも分析試料がどうだったかも，あるいは検出系がどうなのかも，何もわからず，そのうえで何か想像するなら，どっかで試料を注入するときにインジェクタをはでに汚して，それがインジェクト操作をするたびに出てくるとかくらいしか．

補足

c80s3xxx様

毎回質問に答えていただき有難うございます．
おっしゃるとおり，私の質問情報だけでは伝わりませんよね，すみませんでした！
カラムはPVA充填のGPCカラムで，移動相はリン酸緩衝液，流速は0.5mL/min,UV検出器で検出波長は210nmです．
この条件で1.2g/Lのポリマー（ポリα-ヒドロキシアクリル酸ナトリウム；PHA）を測定すると，通常は，溶出時間10分（tr=10）に大きくピークが検出されます．
ところが，一昨日同じ試料を同じ条件で測定したところ，tr=10のエリア値が約2倍に検出されました．その後カラムを洗浄してもtr=10のエリア値は約2倍のままです．感度も変えていないし原因がわかりません．
ご助言宜しくお願いいたします．