HPLC測定による検出限界（DL）、定量限界（QL）の計算方法
- HPLC測定における検出限界（DL）と定量限界（QL）の計算方法を教えてください。
- DL（検出限界）とQL（定量限界）は、HPLC測定において重要なパラメータです。
- DLとQLの計算式はそれぞれDL=3.3σ／SおよびQL=10σ／Sです。具体的な計算方法について詳しく教えてください。
- ベストアンサー
検出限界（DL）、定量限界（QL） 計算
HPLC測定をしています。検出限界（DL）、定量限界（QL）を計算したいのですが、 DL=3.3σ／S σ:レスポンス標準偏差 S:検量線の傾き QL=10σ／S σ:レスポンス標準偏差 S:検量線の傾き となっています。式をみてもよくわかりません。具体的にどのようなことをすれば良いのでしょうか？ 式の意味も、検量線の傾きは、わかるのですが、レスポンス標準偏差がわかりません。 具体的にどのような分析結果をどのように算出すれば、良いのでしょうか？ 検出限界を求めるために、以下のようにHPLC測定をしました。結果は、 0.0001%試料 では、面積値18296、21926、223540 0.00005%試料 では、面積値5828、7156、6166 0.000025%試料では、面積値791,803,797 （マニュアルでピークを検出津） 0.00001%試料では、nd です。
- ranks7
- お礼率93% (218/232)
- 化学
- 回答数1
- ありがとう数7
- みんなの回答 （1）
- 専門家の回答
質問者が選んだベストアンサー
検出限界（Detection limit） 定義：検出限界とは，試料に含まれる分析対象物の検出可能な最低の量又は濃度のことである．検出限界では定量できるとは限らない． 評価方法：通例，検出限界における消費者及び生産者の危険率が5 %以下となるように検出限界を定める．検出限界は，ブランク試料又は検出限界付近の分析対象物を含む試料の測定値の標準偏差及び検出限界付近の検量線の傾きから算出される．例えば，検出限界は，測定値が正規分布し連続な場合には，検出限界付近の検量線の傾き及びブランク試料の測定値の標準偏差から，次式により求めることができる． DL＝3.3 シグマ/slope DL：検出限界 シグマ：ブランク試料の測定値の標準偏差 slope：検出限界付近の検量線の傾き クロマトグラフィーの場合には，測定値の標準偏差の代わりにノイズ・レベルを用いることができる．分析法の検出限界が試験の規格値よりも小さいことを確認する． 定量限界（ Quantitation limit） 定義：定量限界とは，試料に含まれる分析対象物の定量が可能な最低の量又は濃度のことである．定量限界の分析対象物を含む試料の測定値の精度は，通例，相対標準偏差で表して10%である． 評価方法：定量限界は，ブランク試料又は定量限界付近の分析対象物を含む試料の測定値の標準偏差及び定量限界付近の検量線の傾きから算出される．例えば，定量限界は，測定値が正規分布し連続な場合には，定量限界付近の検量線の傾き及びブランク試料の測定値の標準偏差から，次式により求めることができる． QL＝10 シグマ/slope QL：定量限界 シグマ：ブランク試料の測定値の標準偏差 slope：定量限界付近の検量線の傾き クロマトグラフィーの場合には，測定値の標準偏差の代わりにノイズ・レベルを用いることができる．分析法の定量限界が試験の規格値よりも小さいことを確認する．
関連するQ&A
- 検出限界（ＤＬ）を求める方法
HPLC初心者です。イソフラボンの分析を行っていますが、色々調べても検出限界の求め方が分かりません。初歩的な質問ですみません。 『ブランク試料又は検出限界付近の分析対象物を含む試料の測定値の標準偏差及び検出限界付近の検量線の傾きから算出される。例えば検出限界は測定値が正規分布し連続な場合には、検出限界付近の検量線の傾き及びブランク試料の測定値の標準偏差から、次式により求めることができる。DL=3.3σ/Slope』 ・ブランク試料というのはイソフラボンのスタンダードのことでしょうか。 ・この検量線はイソフラボンの濃度をいくつか変えて（1ppm,2ppm,3ppm・・・）測定した値で回帰直線を求めたものでしょうか。 宜しくお願い致します。
- 締切済み
- 科学
- 定量下限算出について
ＨＰＬＣの定量下限を標準偏差法を使って算出したいと思っています。 算出法として、 『定量限界付近の濃度の分析対象物を含む試料を用いて検量線を作成し、回帰直線の残差または切片の標準偏差をσとし、回帰直線の傾きをＳとした場合、ＤＬ＝１０(σ／Ｓ)で表される。』 を参考にしました。 そこで質問なのですが、 １）回帰直線の残差の標準偏差の解釈 検量線の各点において、 （実際の測定で出た数値）と（最小二乗法によって求め た直線式から導かれる数値）の差の標準偏差 という解釈でよいのか？ ２）切片の標準偏差とは何を意味しているのか？ 何度か測定した際の切片の標準偏差という意味?? ３） 最終的にその定量下限値が妥当であるかを示すデータが必要。ということなのですが、何度か定量下限値の試料を測定し、値にばらつきがない事を確かめればいいのでしょうか？ 過去の質問や、国立環境研究所等のサイトも見てみたのですが、理解ができませんでした。 わかる部分だけでもいいので、よろしくお願いします。
- 締切済み
- 化学
- 検出限界・定量限界の算出方法について。
環境水中の微量分析をやってます。 検出限界（３Ｄ）・定量限界（１０Ｄ）を求めるさいに、 検出力（Ｄ）を算出しますよね。 σR ｄＣ Ｄ＝ｔ（ｎ－１、０．０５）── ・ ─── √ｎ ｄＲ σR：標準偏差 Ｃ：濃度 Ｒ：応答値 ここでの「応答値」とは、 実際の分析値、つまり試料濃度でよいのでしょうか？ それとも面積、高さの平均値なのでしょうか。 教えて頂ければ幸いです。
- 締切済み
- 環境学・生態学
- 測定値の誤差範囲
過去の質問等を捜してみたのですが、うまく見つけられなかったため質問させていただきます。 HPLCで絶対検量線法を使って未知成分の分析を行いました。 濃度を横軸、ピーク面積を縦軸としてエクセルを使用して検量線を求めたところ、y=20000x-600, R2（相関係数の2乗）が0.9995となりました。 未知試料はn=3で行い、検量線から求めた未知試料濃度が、1.328、1.319、1.335となり、それらを平均して結果をだしたのですが、測定値の誤差範囲がどのくらいあるのかというのを聞かれ困っています。 測定結果±○○という感じで知りたいみたいなのですが、単純に求めた未知試料の濃度の平均と標準偏差ではいけないような気がします。 ↑ 検量線のばらつきは考慮されていませんよね？ 検量線のばらつきを考えて測定値の誤差範囲を決定するというようなことはできるのでしょうか？ 理解不足、言葉の使い方等おかしな部分もあるかと思うのですが、よろしくお願いいたします。
- ベストアンサー
- その他（学問・教育）
- 傾きの差の信頼限界を求めるには
共分散関係かなと少し勉強してみたのですが、傾きに差があることの検定は見つかるのですが 傾きの差の信頼限界について見つかりませんでした。よろしくお願いします。 測定値を時系列で並べてその傾きが「求める値」 となるような計測をしています。 バックグラウンドの測定での傾き(Bo) 標準試料(求める値=ms)を測定したときの傾き(Bs) 試料１を測定したときの傾き(B1) から、試料1の求める値m1 = ms * (B1 - Bo)/(Bs-Bo) とするわけです。 測定数 n, 相関係数R、回帰の傾きB、Xの分散をSxx、残渣の分散Se、傾きゼロに対するt値 t とすると 次のような結果になりました。(分散は大きいので10^6で割った値） バックグラウンド n=19 R=0.999998 Bo=19.53, Sxx=260.40, Se=0.32, t=2301 標準試料 n=23 R=0.999993 B1=20.95, Sxx=311.41 ,Se=1.85, t=1244 傾きBoに対するt値85 自由度20近辺のt値は99%でも3弱ですから、 各々の傾きも、傾きに差があることも検定できていると思うのですが、 各々の傾き、傾きの差の信頼限界はどのように考えたらよいでしょうか。 測定試料の m値の測定誤差、測定限界を知りたい というのが目的です
- ベストアンサー
- 数学・算数
- 定量下限について
GC-MSを用いて定量下限を求める時の方法について教えてください！ いろいろな分析会社のHPやJISなどを見ていると、検量線用標準試料の最低濃度のものを用いて5回なり10回なり測定したときの標準偏差をとり、これを10倍した10σを定量下限値とするようなことが書かれていました。 初心者的な質問になってしまうのですが、この10回測定するというのは、私が見たり読んだりした文脈からは、1度調整した溶液を連続で10回測定すると読み取れたのですが、正しいでしょうか？1ppmなら1ppmの溶液を10個作製して、これを10回測定するというのとは違いますよね？すいませんが教えてください。
- ベストアンサー
- 化学
- FIDガスクロマトグラフィーを用いての定量分析
二成分（トルエンとエチルベンゼン）に対してそれぞれ縦軸に面積、横軸に各物質の体積をとったグラフ（検量線）を描く。 次に未知試料を注入し、得られたトルエンとエチルベンゼンのピーク面積から検量線を用いて混合比を決定する絶対検量法と、 内部標準物質（トルエン）と試料中の定量しようとする成分の純粋物質（エチルベンゼン）との混合物を種々の比で調製したものを注入する。試料のピーク面積（A）と内部標準のピーク面積（As）との比（A /As）を縦軸にとり、横軸に混合比（エチルベンゼン／トルエン）をとって検量線を作成する。 次に未知試料を注入し、得られたトルエンとエチルベンゼンのピーク面積の比から検量線を用いて未知試料のトルエンとエチルベンゼンの混合比を決定する内部標準法の実験を行ったんですが、 両方のやり方で未知試料の混合比が違っていました。 その考えられる理由として何か教えてください。 長々とすいません。。
- 締切済み
- 化学
- ＨＰＬＣによるカフエインの定量での溶離液について
ＨＰＬＣによるカフエインの定量を行う際、まずメタノール１００％を流した後に水：メタノール＝６０：４０に切り替えて溶離液を流した後、カフエインの標準液を注入し、検量線を作成し、その後、カフエインを含む試料（お茶など）を流し、試料濃度を検量線より求め、終了して、また１週間後にカフエインを含む別の試料の定量を行う場合もその都度、最初と最後にメタノール１００％を送液するように言われました。１週間後にいろんなお茶など同じカフエインの定量を行う場合でも、まずメタノール１００％を送液した後、水：メタノール＝６０：４０で濃度決定を行い、またメタノール１００％を送液するようにしなくてはいけないのでしょうか。水：メタノール＝６０：４０で送液してそのまま終了し、そのまま新たな別のカフエイン試料を注入してはなぜいけないのでしょうか。なお、ＨＰＬＣはカフエインの定量だけで他の人はＨＰＬＣは使用しません。ＨＰＬＣの初心者で分かりませんので宜しくご指導お願いいたします。
- ベストアンサー
- 化学
- 濃度定量計算式の解説をお願いします
分析初心者です。 食品添加物のプロピレングリコール（PG)の下の定量式の意味を教えて下さい。 PG含量(%)＝CV1／2,000×V2×W C：測定液中のPG濃度(ug/ml） ・・・200(ug/ml） V1：試料液全量(ml) ・・・・・・・・100(ml) v2：定量の際用いた試料液量(ml)・・5(ml) w：試料の採取量(g) ・・・・・・・・５(g) 計算式の2,000の意味が分かりません。 測定機器はＦＩＤ－ＧＣで検量線は内部標準法です。 ちなみに化学の知識は中学程度です。 初めて添加物の検査をすることになりました。 よろしくお願いします。
- 締切済み
- 化学
- 含量の計算で行き詰っています。
検量線を作成しました。 単位に振り回されてよくわからなくなっています。 最終的な濃度を教えてください。 調製方法 標準品 0.1028ｇ秤量しメタ-ノルで100mlにUP（標準原液） さらにこの原液を１０ｍｌとってメタで１００ｍｌにUP 標準溶液-１（１028μg/ｍL ？） 同じく原液を３ｍｌとってメタで１０ｍｌにUP 標準溶液-２ 同じく原液５ｍｌをとってメタで１０ｍｌにUP 標準溶液-３ 検量線の傾きが1.16 Y切片が－3.0 としたとき、 求めたい含量の調製方法 求めたい試料0.1ｇ/100ｍｌメタ-ノルUP さらにこの液を5ｍｌ/１０ｍｌにUPにしたとして、得られたクロマトの試料面積が5.534となりました。 含量をμｇ/ｇで出すには どういう計算式になりますでしょうか？
- ベストアンサー
- 化学
お礼
お礼が遅くなってすみません！！ DL.QLについて、詳しくご説明くださり有難うございました。 解決しました！！