- 締切済み
枯草菌
枯草菌を採取、培養したいのですが下記の方法できますでしょうか？ (1)枯れはを山等から採取してきて沸騰する(５－１０分程度） (2)(1)で作った水から枯れは等をろ過する (3)(2)で出来た溶液にエアレーションをして放置する１週間ほど放置する（20℃前後） 以上で採取はできますでしょうか？ また、培養ですが、(3)できた溶液に砂糖、塩（ミネラル）をいれて エアレーションをしておけば培養できますでしょうか？ 使用用途ですが、増やした菌を畑、水田、飼料として使いたいのですが どうぞご教授ください
- zinza-over
- お礼率66% (2/3)
- 生物学
- 回答数1
- ありがとう数4
- みんなの回答 （1）
- 専門家の回答
みんなの回答
可能だと思います。↓wiki http://ja.wikipedia.org/wiki/%E6%9E%AF%E8%8D%89%E8%8F%8C ですが、記述してあるように繊毛虫類や原生動物の餌になってしまうので、その当りを気をつけないとただ腐るだけかも…。
関連するQ&A
- グラム陽性菌からのプラスミド抽出について
私は大学院生をしており，微生物の遺伝子について研究を行っています． しかし，最近は実験をしても，期待するような成果が得られず実験が滞っています． その実験というのは「グラム陽性菌からのプラスミド抽出」です． 院生でありながらこのような質問をするのは非常に恥ずかしい事だとは分かっているのですが，最近は全然うまくいかず，非常に困っています． このグラム陽性菌が有する約120 kbのプラスミドを抽出したいのですが，アルカリ法で抽出した後にアガロースゲル電気泳動を行ってもバンドを確認することができません． また，この菌は複数のプラスミドを有しており，比較的サイズの小さなプラスミド（約20 kb以下）までは頻繁に確認することができます． 以下に実験手順を記入しますので，このような大きなプラスミドでも抽出できるようにするためのアドバイスをしていただきたいです． １．前培養：植菌して12～20時間振とう培養 30℃ LB液体培地 ２．本培養：前培養液から50 μLを5 mLのLB液体培地が入った試験管に添加，6～8時間30℃で培養 ３．本培養液全量を15 mL容チューブに移し，遠心分離． ４．培養液を捨て，沈殿にSolI 9mLを加えて激しく撹拌 ５．この溶液を遠心分離し，溶液を捨てる ６．沈殿に1 mLのSolIを加え，激しく撹拌 ７．16 mg/mLの濃度でリゾチームを溶かしたSolIを1 mL加えて穏やかに混合 ８．37℃で2時間30分～4時間反応させる．（30分を目安に穏やかに混合） ９．SolII 4 mLを加え，穏やかに混合，5分間室温で放置 １０．SolIII 3mLを加え，穏やかに混合，20～30分間氷上で放置 １１．この溶液を冷却遠心分離，沈殿は廃棄し，溶液のみを新たな15 mL容チューブに回収 １２．イソプロ 7 mLを加え，混合．室温で1時間放置 １３．冷却遠心分離を行い，沈殿を800 μLのTE溶液に溶かす １４．この溶液を1.5 mL容チューブに移し，フェノールクロロホルム溶液600 μLを加えて5分間混合 １５．遠心分離を行い，上層の溶液を新たなチューブに回収（タンパク質の層を回収しないように注意） １６．14～15の操作をもう一度行う． １７．回収した溶液にイソアミルアルコール/クロロホルム溶液600 μLを加え混合 １８．遠心分離をおこない，上層の溶液を新たな1.5 mLチューブに回収 １９．この溶液に3M 酢酸ナトリウム溶液を添加（回収した溶液の1/10量の酢酸ナトリウム溶液） ２０．この溶液と等量のイソプロを加え，室温で2時間放置 ２１．遠心分離を行い，溶液を捨て，沈殿に70%エタノールを加え遠心分離 ２２．溶液を捨て，5分程この沈殿物を乾燥させる ２３．沈殿をTEに溶解させ，サンプル完成 （この時RNAも除去しています） このような実験手順なのですが，何かアドバイス，不備な点などがあったら教えてください．宜しくお願いします（キットを使うというのは無しで・・・）． PS．この大きなプラスミドは今まで抽出できたことがないわけではなく，この一年ほどで回収できる頻度が著しく低下しているという状況です．作り置きしておいた試薬を作りなおしているのですが，なかなかうまくいきません．失敗したときのアガロース電気泳動写真も添付しておきます．
- ベストアンサー
- 生物学
- 大腸菌の形質転換を利用したクローニング
先日実験で、大腸菌の形質転換を利用したクローニングを行いました。 集菌と科学的処理 (1)大腸菌の培養液を氷上で冷却した。 (2)培養液5 mLを遠沈管に移し、3000 rpmで5分間遠心した。 (3)大腸菌のペレットを崩さないように上側にして、培養液の上澄みをデカントして捨てた。 (4)あらかじめ冷やしておいた形質転換用溶液（TSS）500 nLにDMSOを25 nL入れて、混ぜた。 (5)(4)を500 nL加えた。 (6)ボルテックスで穏やかに撹拌して、ペレットを縣濁した。 (7)懸濁液を100 nLずつエッペン管に分注して、形質転換に用いた。 (8)ライゲーション反応のDNA溶液を5 nL加えて、指先で軽く撹拌した。 (9)氷上に14:05～14:25頃まで放置して、DNAを取り込ませた。 寒天培地への植え継ぎ (1)DNAを取り込ませた大腸菌に500 nLのLB培地を加えた。 (2)37℃で15～60分インキュベートして、抗生物質耐性遺伝子が活性化するのを待った。 (3)別の遠沈管に大腸菌を50 nL移し、BL培地を250 nL加えかさあげした。 (4)それぞれの遠沈管に40 nLの100 mM IPTGと40 nLの40/mL X-galを加え、軽く撹拌した。 (5)100 ng/mLのアンピシリンを含むLB寒天培地2枚に、それぞれの遠沈管の大腸菌を撒いた。 (6)滅菌したスプレッダーで水気がなくなるまで満遍なく広げた。 (7)37℃の気相インキュベーターに入れて、一晩放置した。 このような手順で実験を行ったのですが、全くコロニーが出来ませんでした。 なぜでしょうか？ よろしくお願いしますm(__)m
- ベストアンサー
- 生物学
- 寒天平板法
寒天平板法の２デッシュ法を使用して菌数を測定しています 先生にやりかたを説明しろといわれているのですが私は国語（文章力）にかなり自信がなく、わかりやすく１分くらいで説明するためにどの用に言えばいいのかアドバイスください 原稿 原菌入りの原液から１ｍｌ採取して、滅菌希釈水９ｍｌの中に採取した１ｍｌを入れ１０倍希釈します。１０倍希釈した溶液から１ｍｌ採取してシャーレに入れ培地を入れ培養します。次に１０倍希釈した溶液から１ｍｌ採取して滅菌希釈水にいれ１００倍希釈していき１０の５乗まで希釈して培養していきます。 原稿はこうなのですが、どこが変か教えてもらえないでしょうか？
- ベストアンサー
- 生物学
- またまた塩の結晶についての質問です。
またまた塩の結晶についての質問です。 ２mmほどの結晶核を釣り糸に瞬間接着剤で付け、ティッシュでろ過した飽和溶液に浸しているのですが、 核が大きくなっていくというよりは、小さな結晶が張り付いていっているように見えます。 このまま放置しておいてきれいな形になるのでしょうか？
- 締切済み
- 化学
- 微生物検査のサンプル放置時間
こんばんは。 私は食品会社で微生物検査に携わっている者です。 今回は皆さんにお尋ねしたい事があります。 この度、画線培養した菌を希釈水で薄めてサンプル溶液としてあるテストをおこないます。2条件でテストをおこなうのですが、1条件につき30分程時間がかかります。 その際、あらかじめ作成したサンプル溶液はずっと放置しておいても大丈夫でしょうか？ もしわかるかたがいらっしゃいましたら教えてください。 よろしくお願いいたします。
- ベストアンサー
- 生物学
- 枯草菌が粘りません。
文献通りの菌株を文献通りの方法で培養して、文献では培養液の粘性が非常に高くなると書いてあるのに全然粘性が上がりません。同じ菌株を培養した他の報告や文献に従って培養してもさらさらな培養液しか出来ません。ｐHや温度など、いろいろと条件を振って培養してもうまくいきません。継代したのがいけなかったのかと思い菌株バンクから届いた元の菌を使っても駄目でした。思い切ってスーパーで納豆を買ってきてその納豆菌を使ってみたのですが結局駄目でした・・・という相談を大学の後輩にされたのですが解決策が見つかりません。私自身が実験したわけではないので、実験ノートに書かれていない部分（培地の滅菌の仕方など）にミスがある可能性はあるのですが、聞いた限りでは特に問題はないようで・・・。 先輩としてちょっといいところを見せようとしたのですが、ことごとく空振りに終わってしまいちょっと焦っています。「ここんとこちゃんとやった？」というチェックポイントや「このプロトコルに従ってやったらうまく行ったよ！」という情報などがありましたらよろしくお願いします。
- ベストアンサー
- 生物学
- 自然農の土作り、良い土壌菌を育てるには
お世話になります。 実家でほとんど放置されていて、ゴミ置き場のような状態になっていた畑の管理を任されて６年ほどになります。当初、農業の経験はほとんどなく、とりあえずゴミを全部片づけ（これ自体大変な作業でしたが）、あいまいになっていた畑の境界線など、きちんと整理して、おそらく長年、迷惑をかけていただろうと思われる近隣の農家の人にちゃんとあいさつしながら、とりあえず、収穫よりも、草刈りだけはちゃんとやろう、清潔な畑にしようと思いながら、６年ほど、やってきました。 当初、気持ち悪い虫の大群、他の畑ではあまり見ないような変な草などがたくさん生えていたのですが、さすがに６年も管理すると、だいぶ気持ちの良い雰囲気に変わってきました。１年目はほとんどスギナしか生えず、２年目、３年目は、タンポポやオドリコソウなどが大繁殖して、どうなることやらと思っていたのですが、しだいに草の種類も落ち着き、今では約20種類（正確に数えたわけではないですが）以上の草は、畑に生えるようになってきています。背丈の伸びやすい草も減ってきて、草刈りもだいぶ楽になってきました。 専業農家を継いでいる幼なじみで、長年の親友が一人いて、よく彼の畑でアルバイトしながら農業技術を学んでいるのですが、よく仕事が終わったあと、二人で話しているのですが、良い土というのは、とりあえず色々な草がまんべんなく生えるような土、菌体のバランスが良い土ということで、二人の意見はほぼ一致しています。彼は菌体のバランスを整えるため、酵母菌や納豆菌などを培養して、自分の畑に散布しているようです。僕は福岡正信という人が書いた本を読んで、自然農を始めたのですが（農業にはそれ以前から興味があった）、福岡先生は若い頃、熱心に菌体の研究をされていた人で、その人が、最終的に、特に何もしなくていい、という自然農の境地に行き着いたわけですから、僕もそれにならって、できるだけ、特によけいなことはしないように、やってきました。 福岡先生も、無肥料、無除草とかいいながら、結構な量の鶏糞をまいたり、腐植を増やすため、木材のチップを山にばらまいたりされていたようなので、僕も、田んぼのワラや、玄米を精米した時に出る米ぬかなどを、割と畑にばらまいたりしています。あと、油かすなどもネットで注文してまいています。お金がないので、あくまで気休め程度ですが。 自然農を始めてから、特に植物が育つスピード、また、有機物が腐っていくスピードというものに、着目するようになりました。良い畑（生態系に恵まれ、栄養分が十分にあるような畑）では、物が早く成長し、また、早く風化していくように思えるからです。これは菌体の活動が活発であることから、こういう現象が起こるのではないか、と思っています。 そこで、質問なのですが、畑において、良い土壌菌を育てるために、何かできることはあるのでしょうか。自分が管理している畑とは別に、家の隣に、結構大きな畑があるのですが、そこの一部を最近、自分が管理して、両親が作っている野菜のカラ（作物の残骸）を薄くばらまいて、稲ワラや米ぬかをまぶしておいているのですが、（福岡さんいわく、「土ごと発酵」）そこに積んだ有機物の腐り方だけが、異常に早く、しかも腐る、というよりも、全てが茶色く変色し、ぽろぽろと砕けて、最終的に粉末状になっていく、というような、変わった腐り方をしています。 何か良い菌体がいるんじゃないかと思い、さっそくゴミ袋に土を入れて自分の畑にまいてきたのですが、こういうやり方（単に土を他の場所に移すだけ）でも、菌というのは移動できるものでしょうか？また、このようなやり方は、効果があると思いますか？できれば農業に詳しい方にお答え頂きたいのですが…。よろしくお願いします。
- 締切済み
- 農学
- 過マンガン酸カリウム酸性法について
化学的酸素消費量（COD）の実験で過マンガン酸カリウム酸性法を行います。 試薬の調製で0.025Nの過マンガン酸カリウム標準溶液を調製するのですが、実験書では「KMnO4 0.8gを水1Lに溶かし、沸騰水浴上で2時間加熱し、一夜放置後濾過する」とあります。 その場合、加熱している間に蒸発して、濾過前には900ml位になってしまうのですが、蒸発分も考慮して0.025Nになるのでしょうか？ もしくは、蒸発した場合は再度1Lの定容した方がいいのでしょうか？ ちなみに、定容しなおした溶液を標定すると、0.020Nくらいになってしまいました・・ あと、蒸発を防ぐためにラップなどをかけた方がよいのでしょうか？ また、0.025Nをモル濃度にするためにはどのようにしたらよいのでしょうか？ 試薬で粉末のものと、0.02mol/L（N/10)の溶液のものとがあるのですが、それぞれどうすればいいのでしょうか？ また、粉末の方が安定性があるため粉末を使用した方がよいのでしょうか？ よろしくお願いします。
- ベストアンサー
- 化学
