負電荷アミノ酸置換で本当に擬似リン酸化されるのか？

質問

お世話になっています。疑問に思うことがあるので質問させてください。
　自己リン酸化を行うタンパクのその部位を、負電荷を持つグルタミン酸やアスパラギン酸で置換をしてやると負電荷をもつリン酸化の代わりとなり結果自己リン酸化に近いこととなり、常に活性化されている状態になる…と、とある文献にしるされていました。しかし本当にそのように都合よくなるのでしょうか？明らかにリン酸基とこれらのアミノ酸は構造は違いますし、分子量サイズや電荷の強度に関しても無理があります。ですから凝集などの立体変化が起こり結果失活してしまうのでは…と思いました。
　このことに関して皆さんはどう思われますか？お時間がありましたら是非御意見をお聞かせください。

回答No.2

tatoo

そもそも、どんな論文でどうか書いてあっても、
どんなラボでどういう実験をして確認していても、
自分の実験系で確認するのが普通だと思います。
例えばあるタンパク質はリン酸化して活性化するとAやBやCの活性を持つとして、
その変異体を、ある論文では（１）という実験方法でA活性をミミックするということを確認した上で、その変異体を使って実験をしてたとします。
しかし、自分はA活性を（２）という実験系で見てたいとすればどうでしょうか。
それはあくまで、その変異体を自分の実験で使えるかも、という
「ヒント」を得ただけで、実際（２）実験系で使えるかどうかは
自分でポジティブコントロール実験が必要なのではないでしょうか？

また、その変異体がA活性をもつとあっても、B活性、C活性を持つかどうかということも自分の実験系で調べる必要があると思います。

そういう実験結果は、論文の図にはならないかもしれませんが、
最近はサプリメンタルデータとして求められる思います。

お礼

ご意見ありがとうございます。実験操作ひとつとっても考えなくてはいけないことが多くあることが再認識できました。もう一度自分の実験の骨組みについて考えてみたいとおもいます。