- ベストアンサー
限外ろ過
- みんなの回答 （1）
- 専門家の回答
質問者が選んだベストアンサー
限外ろ過膜やスピンカラムで、そういうのはなさそうですね。 少量サンプルなら、Sephacryl S-200 あたりでミニカラムをつくって、重力落下でゲルろ過し、フランクションをとれば（例えば、0.5 mLバッファをアプライしてはその流出液を集めていくとか）、はじめのフラクション（void volume+α）の中に200 kDa以上のタンパク質が分離できるのではないでしょうか。
関連するQ&A
- SDS-PAGE用マーカー
SDS-PAGE用マーカー 培養上清を限外濾過で濃縮し、100KDa以上1000KDa以下のタンパクをターゲットに考えSDS-PAGEを行っているところですが、200KDaくらいまでのタンパク量のサイズマーカーしか持っていません。ネットで調べているのですが見つけられないので、教えて頂きたいと存じます。ちなみに、複合体を作ったタンパクである可能性があるため、BN-PAGEを行うことも考えていますが、その場合はサイズマーカーはまた別物なのでしょうか？どうぞよろしくお願い申し上げます。
- ベストアンサー
- 生物学
- 限外濾過に使用するメンブレンのＰＭとＹＭの違い
表題通りです。 あるタンパクを限外濾過する際にＰＭを使用していますが，さらに緻密と思えるＹＭとはどのような場合に使用するのでしようか。 また，ＰＭとＹＭとは何の略なのでしょうか。 子供に聞かれて，父親の権威が現在急降下中です。誰か助けてください。
- ベストアンサー
- 化学
- ゲル濾過カラムによる精製
分子量1000～5000程度のものを回収してきたいのですが、ゲル濾過スピンカラムを2回繰り返して回収することはできるでしょうか。 まず排除限界1000程度のゲル濾過で分子量1000以上のものを回収し、次に排除限界5000くらいのゲル濾過で分子量5000以下のものを回収するという操作をしようと考えています。 ゲル濾過カラムを遠心する際は遠心速度と時間はどのように決定すればよいかでしょうか。また綺麗に排除限界分子量でわけるためには、どのような工夫が必要でしょうか。 アドバイス宜しくお願いします。
- ベストアンサー
- 生物学
- 電気泳動のときの、限外ろ過の意味
実験で、大腸菌からの抽出液を電気泳動しました。 その際にサンプルを限外ろ過をして濃縮したのですが、なぜこの作業をしたのかが理解できません。 これは、ただ単に電気泳動はサンプルを少量で高濃度にしたほうがいいからなのですか？ それとも、他の意味があって限外ろ過をしたのでしょうか？
- 締切済み
- 生物学
- 分離精製後のペプチドの検出限界について
ペプチドの検出限界について教えて下さい。 大腸菌発現系などで発現させたペプチドを精製したいと考えています。最終的に、27kDaのGSTと目的ペプチド1kDaをゲル濾過等に よって分離することを考えているのですが、精製後確認する方法がなく、困っています。 電気泳動では、10kDaくらいないと分けられなそうなのですが、1KDA~3KDA程度のペプチドを検出するにはどのような手法があるのでしょうか。 よろしくお願いいたします。
- 締切済み
- 生物学
お礼
お礼が遅くなってすみません。 スピンカラムはないのですね。Sephacryl S-200というものを検討してみます。回答ありがとうございました。