標識IgGが析出してしまう

質問

特殊な質問でごめんなさい。
ある抗体（IgG）を蛍光標識（たとえばフルオレッセインやローダミンなどで）したのですが、PBSバッファーなどで精製したところ、標識したIgGが、少しですが沈殿しているようなのです。
IgGは疎水性が高いので、析出しやすいとか聞くのですが、析出しない方法、あるいは、析出したIgGを溶解する方法などないものでしょうか。IgGが変性してしまっているのでしょうか。
もし、お分かりになる人が居られましたら、お答えお待ちしております。

回答No.1

dora1

的外れかもしれませんが。

FITCもかなり疎水性が強いですよね。蛍光標識とタンパクの割合で、タンパクに対する標識密度が高すぎる、などはないでしょうか？

蛍光標識で、FITCなどよりずっと蛍光が強く、波長特性もすぐれていて、退色しにくく、またかなり親水性が高い蛍光物質もいろいろありそうです（Cyシリーズ、Alexaシリーズなど）が、標識を変えてみるはいかがですか？

お礼

dora1さん、回答有難うございます。
Cy色素とかAlexa色素だったら、スルホン酸基を持っているので溶解性が高いと思います。蛍光波長も様々揃っているようですし、いいと思います。しかしながら、頑固にもどうしてもFluoresceinを標識したのです。
やはり一度沈殿を生じると溶かすことは困難なんでしょうね。