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1.5MTris-Hcl(ph8.8)のつくりかた
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確かに、トリス緩衝液の作り方を訊いてくる研究者(学生も含む)も珍しいと思いますけど・・。 まず、(1.5×Trisの分子量)gのTrisをビーカーに量り取る。次に水を適当に(HClを加えるので、その分少なめに)入れる。スターラーで攪拌する(1.5Mのトリスは水にはいくら撹拌しても溶けない。スターラーバーを回すには少しコツがいるが、見つけてください)。pH電極を攪拌中の溶液に浸して(深く差し込むとスターラーバーが電極を破壊することがあるので注意)pHを計りながらHClを少しずつ加える(一度に大量に加えないように)。HClを加えていくとトリスはそのうち溶ける。pHが8.8に近づいたらHClを加えるのをいったんやめる。 たいていのpHメーターには温度も表示されていると思うが、かなり水温が高くなっているはず。トリスのpHは水温が上昇すると下がり、下降すると上がる。温度1度でおよそ0.1くらい変化するので、10度も水温が変わると無視できない。 それで、pH最終調整の前に水温をこの場合は(この溶液はアクリルアミドの電気泳動、室温で使うものなので)室温くらいに戻す(私は早いので、ビーカーを氷水につけている)。水温が室温程度に下がったら(さっきよりpHは上昇しているはず)改めてHClを加えて、pHを8.8に合わせる。pHがあったら、溶液をメスシリンダーに移し、水を加えて1000mlにする。
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- owata-www
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HClでpH調整です。 気をつけないと、あっと言う間にpHが低くなりますよ
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