- 締切済み
クロラムフェニコールの滅菌のしかたについて
微生物の実験をしているものです。初歩的な質問なんですが、培地にクロラムフェニコールを添加するとき クロラムフェニコール自体の滅菌はどのように行えばいいのでしょうか？ また クロラムフェニコールは濃度１００μｇ/ｍｌらしいのですが これは水に溶かした値なのですか？
- minstrel-j
- お礼率25% (2/8)
- 生物学
- 回答数3
- ありがとう数5
- みんなの回答 （3）
- 専門家の回答
みんなの回答
- Hayate03
- ベストアンサー率36% (112/304)
No.1です。 滅菌済み容器に、滅菌したスパチラで粉末を取り、エタノール（水溶性の抗生物質の場合は滅菌水）で 溶解すれば、フィルター滅菌しなくても特に使用上の問題が生じた事はないですけどね。。 No.2さんの方法に比べると手抜きですが簡便ですので、まあご参考まで。
- kazu-nori
- ベストアンサー率60% (14/23)
クロラムフェニコール（以下CP）は耐熱性があるので、培地に添加した後に加熱滅菌をすることが一般的です。 濃度は培地１Lあたり100mg添加することが多いです。質問者の100μg/mlは、この濃度ですね。 予めエタノールに100mg/mlの濃度でCP溶液を作成しておけば、殺菌前の培地1Lに1mlの割合で添加すれば良いので便利です。 殺菌後に添加する場合は、同じく100mg/mlの濃度の液を作成し、ポアサイズが0.22μmのフィルターで除菌して添加します。 エタノールで溶かしたとしても、その殺菌作用に過度に期待してはいけません。 カビ胞子や細菌芽胞はエタノールで死なないと考えた方が良いです。（細菌についてはCPで抑えられますが、完全ではありません。） CP以外の抗生物質については耐熱性が弱いものが多く、同じく溶液（水で溶けるもの以外はエタノール液）を作成し、フィルターで除菌して添加します。
- Hayate03
- ベストアンサー率36% (112/304)
クロラムフェニコールはエタノール溶液で使用しますので、 滅菌不要です。 容器の口を火炎滅菌すると引火しますから注意してください。
関連するQ&A
- 培地の滅菌について教えてください。
微生物の培地についての質問です。 以下の成分の培地を作り、オートクレーブ滅菌しました。 Glucose／ Polypepton／ Meat extract／Yeast extract／Trace metal solution ／ Tween 80 solution／ Sodium acetate・3H2O／ NaOH 滅菌後のグルコース濃度を酵素法で測定したら、 培地を作った時（つまり滅菌前）のグルコース濃度より 高い濃度になっていました。 これは、実験の誤差（実験の操作に問題があった等）ということなのでしょうか？ 理論的には、グルコース濃度は滅菌前より滅菌後の方が、少なくなるものなのでしょうか？ それとも今回の結果のように、多くなることも理論的に考えられるのでしょうか？ グルコース以外の培地の成分から考えても（上記の成分なので多糖類なども恐らく含まれていないと思いますし）、滅菌によってグルコースが増えるということはあり得ないように思うのですが・・・ 色々考えてみましたが、滅菌中にどのような反応が起こっているのかが良くわかりません。 どなたか教えていただけないでしょうか。
- ベストアンサー
- 生物学
- リファンピシンの希釈について
現在、大腸菌MG1655株を用いて練習のためにリファンピシンを用いたMutation Frequencyの測定を行っています。LB培地500mLを作成し、そこに終濃度100μg/mLとなるようにリファンピシンを加えたいと思っていますが、この場合、原液（10mg/mL）をどれくらい入れれば終濃度100μg/mLとなるのでしょうか？私は数学に弱いためこのような計算が苦手です。どなたか、きわめて初歩的な質問なのですがご教示頂ければ幸いでございます。
- 締切済み
- 生物学
- 15mg/mLのカナマイシンを５０μｇ/mlで加える
来週から実験補助の仕事をすることになり、本を買って勉強しています。 ５００ｍＬの培地に「１５ｍｇ/mL濃度のカナマイシンを５０μｇ/mLの濃度で加える。」らしいのですが、一体何ｍＬ加えればいいのでしょうか？ 一応計算してみたのですが（３００倍？）１．６７２２ｍＬと出ました。 でも、これじゃあ加えにくい数字なので、間違ってるような気がします(-_-;) どうぞ宜しくお願い致します<m(__)m>
- ベストアンサー
- 化学
- カナマイシンとナリジクス酸を混合した時の白濁
薬学部所属の学生です。 分子生物学の実験を行っています。 授業における微生物実験でのことです。 ＬＢ培地にカナマイシン（100γ）とナリジクス酸（15γ）を添加したプレート培地を作製しました。 その際、予めカナマイシンとナリジクス酸を混合すると、白濁しました。 それをそのまま滅菌したＬＢ液体培地に混合してプレート作製を行ってしまったのですが、 なぜこの白濁はおこるのでしょうか？また、予め混合して白濁してしまったものをＬＢ培地に添加した場合、何か問題があるでしょうか？ 詳しい方、お返事よろしくお願いします。
- 締切済み
- 生物学
- 液体培地で培養すると大腸菌が生えてこないんです。
当方、実験初心者です。初歩的な質問になりますが、よろしくお願いします。 目的遺伝子をインビトロジェンのTOPOベクターに組み込み、自作のコンピテントセル（XL10)にトランスフォームし、アンピシリン(Amp）入り寒天培地にまきました。 そこで生えたコロニーをピックアップしてLB+Ampに植菌しましたが、全く増えてきません。液体培地をTBに変更してみましたが、効果はありませんでした。 Amp濃度は１００μg／mlです。 この問題を解決する方法がございましたら、お教えください。 よろしくお願いします。
- ベストアンサー
- 生物学
- 紫外吸収法の測定可能範囲について
紫外部吸収法(280nm)の測定可能範囲について調べたのですが 文献によってその範囲がまちまちで困惑しています。 文献A 0.02～3.0mg/ml 文献B 100μg/ml～ 文献C 定量限界 0.1mg 文献D 100μg/ml～1000μg/ml 文献E 50μg/ml～1000μg/ml とどれが正確な値なのか判断に困っています それぞれの文献の筆者の判断や、その目的によっては前後するのでしょうけど・・・・・ この値だけを使うのなら下限と上限を用いて 20μg/ml～3mg/ml、もしくは20μg/ml～ とすればいいのでしょうけど 実際に実験を行った時に指示された濃度は（10μg/ml～2mg/ml） それとは別の試料を量ったのですがそれは最大4mg/mlまでありましたが測定できました。 この事実を含めると、一体どの値が正しいのか・・・・ ほとほと困り果てています。 一応ですが自分なりには 実際に実験をした最低濃度の0.01mg/mlから3mg/mlを範囲として結論しましたが ご意見いただけませんか？ レポートには自分なりの理由をつけて上記のように書いたのでレポートを書くということだけに専念するなら解決はしたといえなくも無いのですが。 あやふや過ぎて、すっきりせず、この疑問に悶々としています。
- ベストアンサー
- 化学
- 試薬Aに2mLの水を加えたところ、濃度が50μg/mLになりました。
試薬Aに2mLの水を加えたところ、濃度が50μg/mLになりました。 では試薬Aに5mLの水を加えると、濃度は何μg/mLになりますか？ よろしくお願いします。
- ベストアンサー
- 化学
- ウラシルの溶媒と溶解度
ウラシルを培地に添加するとき、現在（１）粉をなるべく細かく砕いて、直接培地に入れる （２）DMSOの溶液にして添加する の２種類の方法をとっています。 （１）は操作が煩雑で、溶け残りが気になります。（２）は培養中に嫌な臭い（DMSOの代謝によるもの？）が出ます。 ウラシル添加の実験をされている方、どんな方法をとっていますか？教えてください。 ウラシルは、最終濃度 50ug/ml になるように調整します。
- 締切済み
- 生物学
- 固形（寒天）培地について
現在、酵母用の培地に重金属を添加して、実験を行っています。しかし、ある程度の濃度以上添加すると固まらなくなります。そこで、培地の寒天濃度を上昇させると培地は固まるようになりますか？また寒天濃度をあげることによってどのような害が出るか、知っている方がいたら教えてください。よろしくお願いします。
- ベストアンサー
- 生物学
- 細胞培養用培地に入れるインスリンの溶解方法
ある細胞の培養に最終9 microg/mL濃度になるようにヒト・インスリン組換体（和光純薬）を添加したいのですが、水に溶けないため困っています。細胞培養用培地添加用インスリンストック溶液の作成方法（溶媒、濃度、保存温度など）を教えて下さい。
- ベストアンサー
- 生物学
お礼
御礼が遅れてすいません 詳しい説明すごく助かりました！！また困ったらよろしくお願いしますｗ