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ウエスタンブロッティングの素朴な疑問
ウエスタンブロッティングの素朴な疑問 ウエスタンブロッティングなどでの泳動の際に、タンパク質サンプルを等量の2×sample bufferで希釈しますよね。その時に、普通のサンプルは綺麗な青色になるのですが、まれに濁った青色のものがあります。なぜなのでしょうか。また、実験への影響はあるのでしょうか。ご存知の方おりましたら…
- sakura0071
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- stringf35
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濁った青色ってどんな色かわかりませんが、 加えている色素がサンプルのpHとかで変色したのでは？ あるいは、冷却してあった場合、SDSが析出したとか…
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2×sample bufferは用事調製で使用しており、同じbufferを使ったサンプルの中で時々変色しているものがあるので、原因はサンプル側にあるんだろうなぁと思っています。 pHでの変色…は有り得るのかもしれませんね。変色していたサンプルは、動物組織の核画分なのですが、ホモジナイザーで破砕されなかった細胞も落ちてきているはずなので、pHに影響を与えるものがあったのかもしれません。タンパクを溶解させているのは0.25Mショ糖なので中性だと思われますが…。