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私は大学院生をしており，微生物の遺伝子について研究を行っています． しかし，最近は実験をしても，期待するような成果が得られず実験が滞っています． その実験というのは「グラム陽性菌からのプラスミド抽出」です． 院生でありながらこのような質問をするのは非常に恥ずかしい事だとは分かっているのですが，最近は全然うまくいかず，非常に困っています． このグラム陽性菌が有する約120 kbのプラスミドを抽出したいのですが，アルカリ法で抽出した後にアガロースゲル電気泳動を行ってもバンドを確認することができません． また，この菌は複数のプラスミドを有しており，比較的サイズの小さなプラスミド（約20 kb以下）までは頻繁に確認することができます． 以下に実験手順を記入しますので，このような大きなプラスミドでも抽出できるようにするためのアドバイスをしていただきたいです． １．前培養：植菌して12～20時間振とう培養　30℃　LB液体培地　 ２．本培養：前培養液から50 μLを5 mLのLB液体培地が入った試験管に添加，6～8時間30℃で培養 ３．本培養液全量を15 mL容チューブに移し，遠心分離． ４．培養液を捨て，沈殿にSolI 9mLを加えて激しく撹拌 ５．この溶液を遠心分離し，溶液を捨てる ６．沈殿に1 mLのSolIを加え，激しく撹拌 ７．16 mg/mLの濃度でリゾチームを溶かしたSolIを1 mL加えて穏やかに混合 ８．37℃で2時間30分～4時間反応させる．（30分を目安に穏やかに混合） ９．SolII 4 mLを加え，穏やかに混合，5分間室温で放置 １０．SolIII 3mLを加え，穏やかに混合，20～30分間氷上で放置 １１．この溶液を冷却遠心分離，沈殿は廃棄し，溶液のみを新たな15 mL容チューブに回収 １２．イソプロ 7 mLを加え，混合．室温で1時間放置 １３．冷却遠心分離を行い，沈殿を800 μLのTE溶液に溶かす １４．この溶液を1.5 mL容チューブに移し，フェノールクロロホルム溶液600 μLを加えて5分間混合 １５．遠心分離を行い，上層の溶液を新たなチューブに回収（タンパク質の層を回収しないように注意） １６．14～15の操作をもう一度行う． １７．回収した溶液にイソアミルアルコール/クロロホルム溶液600 μLを加え混合 １８．遠心分離をおこない，上層の溶液を新たな1.5 mLチューブに回収 １９．この溶液に3M　酢酸ナトリウム溶液を添加（回収した溶液の1/10量の酢酸ナトリウム溶液） ２０．この溶液と等量のイソプロを加え，室温で2時間放置 ２１．遠心分離を行い，溶液を捨て，沈殿に70%エタノールを加え遠心分離 ２２．溶液を捨て，5分程この沈殿物を乾燥させる ２３．沈殿をTEに溶解させ，サンプル完成　（この時RNAも除去しています） このような実験手順なのですが，何かアドバイス，不備な点などがあったら教えてください．宜しくお願いします（キットを使うというのは無しで・・・）． PS．この大きなプラスミドは今まで抽出できたことがないわけではなく，この一年ほどで回収できる頻度が著しく低下しているという状況です．作り置きしておいた試薬を作りなおしているのですが，なかなかうまくいきません．失敗したときのアガロース電気泳動写真も添付しておきます．

こんにちは、新しく買ったパソコンが起動しなくなるので非常に困ってます。アドバイスよろしくお願いします。 この春に新しくノートPCを購入したのですが、そのパソコンはOSがWindowsXPで、Officeのソフトが入っていなかったので自分でOfficeをインストールしなければなりませんでした。 そこで以前購入したOffice2000をインストールしたのですが、不具合が起こるようなので対策を教えてください。 不具合の症状は下記の通りです。 【症状】 MicrosoftのWordを長時間使用していると、「エラーが発生したので終了します。」という警告がでる。 　　　　　　　　　　　↓ その後「このエラーをMicrosoftに送信する」というウィンドウが出て、ここで「送信する」「送信しない」のどちらを選んでもパソコンがフリーズする。 　　　　　　　　　　　↓ 電源を切って再起動してみようとしても、パソコンが起動しなくなる。具体的には起動中のログインの画面まで行かずに、青い画面に白文字の英語の指示が出てシャットダウンという繰り返しになってしまいます。 　　　　　　　　　　　↓ しかし、その後何時間か放置してから再び挑戦してみるとまた起動できて普通に使用できるようになるのです。 上記のようにWordを長時間使用するとかなりの確率でパソコンが起動できなくなってしまいます。また、何時間か放置するとまた起動できるというのもよく分かりません。 素人の私としてはOSのXPとOffice2000が不具合を起こしているのではないかと考えていますが、そういうことはあるのでしょうか？ パソコンに詳しい方、ぜひアドバイスをください。PCが起動しなくなるのが怖くてWordを開けないため、非常に困ってます。 何卒よろしくお願いします。

早速、本題に入らせて頂きます。 弊社はサイト運営会社より依頼を受け、料金滞納者様の調査などを行っております。 現在、お客様がご使用の携帯端末より以前ご登録された[モバイル情報コンテンツ］の管理会社様より弊社に[身辺調査依頼]が入りましたのでご報告させて頂きます。 無料期間中に退会処理がとられていない為、登録状態のまま放置が続いております。 このまま放置されますと発信者端末電子名義認証を行い、電子消費者契約法に基づき、法的措置を行う為の身辺調査に入らさせて頂きます。 調査了承後、後日回収機関により、調査費 回収費用 含めご自宅 お勤め先 第三者への満額請求と変わる場合もございます。 身辺調査の開始・法的処置への移行の前に双方にとってより良い解決に向かう為、詳細の確認、和解、相談等ご希望の方は翌営業日正午 までにお問い合わせ下さい。 ※尚、本通知を最終通告とさせて頂きますのでご了承お願い致します。 (株)（会社名がありました）電話番号もです 顧客担当:山岡 代表取締役:森岡 利治 東京都調査業協会会員 関連団体：社団法人 日本調査業協会 東京都調査業協会 受付時間 平日・10:00～20:00 土曜、祝・10:00～20:00 定休日・日曜 登録した覚えがないので放置しますが、どこに通報したらいいですか？

パソコンが壊れてしまい、修理に出そうとしたのですが、どこかのサイトで自分でパーツを取り替えた方が安くつくということを目にしました。 しかしながらパソコンを組み立てたりといった知識は全くないので、どの部分のパーツを取り替えたらいいのかわかりません。症状を書きますので、詳しい方がいらっしゃいましたら何が故障しているのか教えていただけないでしょうか。(実際は見てみないと分からないと思いますので、予想や参考URLを教えていただけるだけでも大丈夫です。) 症状 ・電源が入らない ・BIOSも起動しない ・電源ボタンを押したら一応動いている音はします。(ファンの回る音？背面から見たら回っていたので…。しかしHDDランプは点灯しません) ・↑の電源を入れた状態で1時間くらい放置していると突然起動します。 ・1時間待たなくても、何度も切ったり入れたりしているとごく稀に起動します。 ・起動後の動作に異常はありません。 自分でもネットで調べてみたのですが、電源が付かないといった症状の場合、BIOSは起動するパターンと完全に電源が入らない(電源ボタンを押してもうんともすんとも言わない)パターンしか見つかりませんでした。 現在は暫く放置して電源が付くのを待ち使用しておりますが、仕事で使用しているパソコンなのでいつまでもこの状態ですと少し不便で…。パソコン修理の見積もりもしてもらったのですが、確かに有り得ない程高く、ちょっと考えているところです。 自分でパーツを取り替えるだけで済むのでしたら、なるべくそうしたいと思いまして相談させていただきました。 どうぞよろしくお願いします。

(株)ファーストシステム 03-42**-38** 顧客担当の武田と申しますがお世話になっております。 この度、現在お客様ご使用中の携帯端末より発信者端末電子名義認証を行い以前ご登録されました「総合情報有料サイト」から無料期間中に退会処理がされてない為に登録料金が発生し現状未払いとなった状態のまま長期放置が続いております。 本通達より再度これ以上放置が続きますと利用規約に伴いお客様の身辺調査了承の上、後日当社調査機関によりご自宅に民事訴訟の通達、第三者への満額請求へと代わります。 現在調査保留中の額面にて処理をご希望であれば早期に精算、 退会処理データ抹消手続きをお願い致します。 ご連絡先 TEL：03-42**-38** 受付時間　 平日：10:00～19:00 土曜：10:00～18:00 定休日：日曜・祝祭日 通信事業担当 武田　和也 代表取締役 関　明雄 認可番号：04649194 尚、本日翌日の弊社営業時間内迄にご連絡の無い場合手続き開始と共に上記記載事項通り、民事訴訟となりますのでご了承下さい。 というメールが先ほど届いたのですが、無視しても大丈夫ですよね？ 初めての質問なので、使い方に不十分があるとは思いますが回答お願いします。

半年前にPCが故障したんですが、時間がなかったので放置していました。 最近になり少し余裕が出来てきたので、直そうと思いました。 色々と試したのですが、上手くいかないので知恵を拝借させていただこうと思いました。 まず、故障？した過程ですがPCを起動したまま放置していたら電源が落ちていたので起動したら、デスクトップ画面にいくまでに1時間くらいかかるほど遅くなってしまいました。 調べたらHDDの故障のようだったので、SATAに交換しFDDにドライバーを入れてマザーにインストールしようと思ったのですが、インストール中にブルーバックになってしまい、インストールが完了しません。 マザーの設定が原因かと思い、CMOSクリアなどしてみたのですが、ダメみたいです。 何か原因が思いつく方いましたら、ご教授お願いします。 PCの内容は CPU：Pen4 3.0gb FSB 800MHz メモリ：DDR 400 1gb & 512mb マザー：PC-I7RD400 HDD：SATA 250gb こんな感じです。 自作ですので保障とかはありませんので、出来るだけ安くすませたいと思っています。 また、買い替えが必要でしたら変更点などご指摘頂けたらとても有難いです。 読みづらい文章でスミマセンが、回答ヨロシクお願いします。

最近、10万円台の自動巻機械式時計を買いました。 長、短、秒の針を12時位置に合わせ、秒針が1周すると長針は12時1分を指すのが普通ですが、実際には少しズレて12時00分57秒くらいの位置にいます。 数時間放置し、再度見ると今度は3秒分ほど超えています。 ゼンマイは十分巻いて、時間合わせのときに、戻し合わせをすれば良いと聞いたので、やってみましたが、ダメでした。 これは機械式時計では普通なのでしょうか？ もしくは私の買ったものはハズレだったのでしょうか？ はたまた、もっと高い（50万円以上）機械式なら、このような現象は起きないのでしょうか？ ちなみにもう1つ持っている海外クォーツ（20万円台）は、そのような現象は起きません。 ただ単にこのクォーツモデルはアタリだったのでしょうか？ 皆さまがお使いの機械式時計は如何でしょうか？ ご回答宜しくお願い致します。

残業代未払いについて。 質問なのですが、私の勤務する会社は残業代という概念が有りません。 給与は何時間働こうが固定です。 状況についてですが、 月５日の休み、毎日１０時間ぐらいの勤務(休憩時間除く)、 年間通して、少ない月で２２０時間、多い月では２８０時間勤務となります。 有給についての話はタブー、早番遅番のシフト表は毎月作るが全員通し、 その話題に触れるのもタブー 私の前任が時間に耐えれず辞め、労働基準監督署に泣きついたらしく、 タイムカードは証拠となる為廃止したそうです。 勤務台帳なども有りません。 以後、業務に改善は無く今に至っているようなのですが、 今手元に有るものは、入社後自分で記録した出勤退社時間のEXELシート 入社後から今までの給与明細、本人には渡さず会社で勝手に作成した雇用契約書（週休２日で毎日８時間勤務で有ることが記載されているが、本人には見せない。よって捺印などもない。放置してあったのでコピー。） あとは、もう、辞めよう。という気持ち。 これらで、残業代を請求することは出来るでしょうか？

● OSはWin7　有線ADSL ● 問題は半年以上前からですが モデム本体の、電源・ADSL・INT・LAN この4つのランプのうち、起動時にLANが点灯しない ということがよくありました。 点灯していないと、PC側でネットワークデバイスを認識していない事になり 接続ができない、ということがたびたびありました。 長時間モデムの電源を入れっぱなしにした後に よく起こるようでした。 しかしその症状は、PCとモデムの主電源を切り（コンセントを抜き）、 15分～1時間程度放置すれば正常に戻ることが多かったので 今まではそれを目安として何とかやっていました。 寝る前には主電源を落とすことも習慣にしました。（翌日の不具合を防ぐため） が、最近、いくら主電源を切って長時間放置していようが LANの不点灯が変わらない状態になってしまいました。 正常に起動させるためには かなりのコツや見極め？が必要で、 その日回線を使えるまでに 少なくとも30分以上は余計な時間が掛かったりします。 急ぎの場合などは、正直かなり不便です。 早朝や夕方などにその不具合が起きやすいので、 たとえば気温が低すぎると起動しづらいなどの特徴があるんでしょうか。 東北で、誰も居ない時間帯は部屋のストーブも消えており 1桁の気温とかがザラなんですが、機器には良くないのでしょうか。 1月の後半ぐらいには工事をして光回線に変わる予定なので それまでは我慢すればいいだけかもしれませんが そもそもの原因がわかっていないので、 判明すればもっと楽に起動できるかなと思い質問してみたのですが… 追記 以前、接続中の回線切れも頻繁だったので　サポートに電話し、 LANケーブル変更・保安器交換・回線速度を落とすなどもしてもらっています。

ノートPCのキーボードが一部浮いてきました。 日本一時撤退前のゲートウェイ製の5年程前に購入した古いものなのですが、数年前からファンの音がうるさいのが気になっていました。左の方が相当熱くなるとは思っていました。でも、まさかこんなことになるとは…驚きました。 昨日ウイルスチェックをしました。時間がかかるのでチェックをしかけてそのまま寝てしまいました（約７時間）。朝起きて見てみるとなんか変です。キーボードの左の方が盛り上がってる…最初はキーが外れたかなと思ったのですが、１つではなく左端１０個くらいのキーが浮いているのです。よく見てみると、キーボードの左の縦のラインが５ミリほど内側へ寄っています。上手く説明できないのですが、PCの端とキーボードの左端の間から下の基盤（？）が見えている状態です。図にしてみました。（KB＝キーボード） 左端｜※｜　　　　　ノートPC　　　　　｜｜右端（正常） 　PC端　KB端　　　　　　　　　　　　KB端　PC端　 ※の部分から基盤（？）が見える状態です。 おそらく基盤（？）が熱で変形、そのせいでキーボードが浮いてきたのだと思いますが、こんなことってあるんでしょうか？確かに７時間も放置していた私も悪いですが、７時間程度なら仕事中つけっぱなしとか、ありますよねぇ。あ、蓋を閉じていました…それがいけなかったんでしょうか… お伺いしたいのは、 こういうことはよくあることなのか？ 「ノートPCの蓋を閉じて長時間放置」は絶対してはいけないことで、私が非常識だった？ 今後発火の危険とかがあるのか？（もう使わないほうがいい？） ということです。 勿論新しいものを買う予定ですが、しばらくこれを使うしかないのでちょっと不安で質問させていただきました。どうぞよろしくお願いいたします。

USB接続ケースに入れた2.5HDDをフォーマットしようとディスク管理 を開き実施したところ、フリーズしました。 固まってしまったためにPC本体のリセットボタンでリセットしたところ 短いビープ音が一度鳴り（今まで起動時はビープ音はしていませんでした） ASUSの画面が表示後黒い画面に A disk read error occurred press ctrl+Alt+Del to restart というエラーメッセージが出てしまいます。 ctrl+Alt+Del を実施しても再度起動しますが 同じ状態になってしまいます。 電源を切って10分ほど時間を空けて起動させたところ ビープ音が二度鳴り ウインドウズ起動画面になりましたが ウインドウズが立ち上がったところで、エラーのダイアログが出て やはり動きません。ダイアログは以下の表示です。 IP　CONFIG.EXE　システムエラー Unknown　HardError 電源を切って1時間以上放置して起動させてところ 正常に作動しました（ビープ音は一度します。） ところが使用中にフリーズすることが多くなりました。 フリーズすると必ず起動しなくなります。 最初に紹介しました A disk read error occurred press ctrl+Alt+Del to restart というエラーメッセージが出てしまいます。 長時間放置すると起動しますが、これの繰り返しで とても使用できたものではありません。 自作機でマザーはASUSのP5GD2　Premiumを使用しています。 CPUはP4６４０　HDDはseagete ST3160023AS いろいろ調べましたが分かりません。 フォーマットを使用とした2.5HDDは他のPCで正常にフォーマットを 完了しました。 良きアドバイスをお願いいたします。

18女子大学生です。 私の家族の清潔観念、安全意識がおかしいのか私が間違っているのか判断してください。 父→一回鼻かんだティッシュをもう一回使うからといって食卓に放置する。綿棒、爪楊枝なども同様。トイレをする時は絶対に扉を閉めない。ひどい時は冷蔵庫、玄関の扉すら締め切らない。5kgコロコロ転がる丸いのダンベルをリビングに放置。 近くに人がいるにも関わらず、平気でダンベル振りかざす。 ジョギング終わりのランニングTシャツを洗わず干して、また次の日使う。 母→まるで雑巾のような汚い布切れを台拭きとして使用する。育児が忙しいからといって掃除する時間が無いと言い、家が埃だらけでも何とも思わない。同じバスタオルを一週間使い続ける事を強要させられる。お風呂のカビを10年くらい放置。 弟→いつのだか分からないお菓子のゴミ、ペットボトル、空き缶らが大量に部屋にある。脱いだ靴下、洋服（部活で泥だらけ、汗だらけの）はリビングだろうと、ろうかだろうと洗面所だろうと絶対に脱ぎっぱなし。 これらの事を親に直して欲しいと言うと、『誰のおかげで生活できてると思っているんだ！』とか『嫌な感じだねー。家族なんだから良いじゃん』とか『神経質すぎるよ』とか言われます。 弟に至っては、何か注意をすると暴力をふるわれます。 自分が特に潔癖症だとは思いませんが、こんな汚い連中と一緒に生活していてストレスしか溜まりません。 もちろん今の生活があるのは、働いてくれる父であり、一応？家事をこなしてくれている？母のおかげだとは思うのですが、恩と清潔は別問題ですよね？ 私がおかしいのでしょうか？ ちなみに、私は自分の部屋の掃除、自分の洗濯は自分やっています。一緒にされたくないし、なるべく関わりたくないので。

自作ＰＣでのトラブルで困っています。 電源ボタンを押下しても起動しません。 （BIOSの画面も出ません） そのまま放置していると１～２時間後に起動します。 起動した後は電源を切って、再投入しても普通に起動 します。 電源関係の問題かと思い、容量が大きい物に変更し ましたが、現象は変わらず発生します。 ハード構成は下記の通りです。 Mother：AOPEN i915Pa-E(J) CPU：P4 3.2Ghz(LGA775) Mem：DDR3200 512MB x 2 HDD：Maxtor DiamondMax Plus 9 6Y120M0 DVD：Pioneer DVR-A08-J Video：GeForce 6600 BIOSは最新版にUPDATEしてあります。 何かヒントでもよろしいのでお願いします。

買ったＰＣにプレインストールされていたMcAfeeの更新期限も切れたまま放置状態ではや数ヶ月。 やっと先日カスペルスキーの体験版を入れたのですが、入れた途端アンチハッカーの「攻撃を検知しました！」とのメッセージが・・・。 私のＰＣは今までずっとハッキングされ続けていたのでしょうか？ 幸い完全スキャンでは一つもウイルスは検知されなかったのですがこれには少々戦慄を覚えました。 画面には時間、攻撃の詳細、攻撃元、プロトコル、ローカルポートなども表示されていましたが見方がわからない・・・。 私はこれまでいつもハッキングされていたのでしょうか？（また、その情報でそれは見知らぬ他人か、知り合いかなどもわかるものですか？）

３ヶ月前に、本来なら校則で髪染め禁止なのでわかんない程度の茶髪にしたのですが、その時一番抑え目の色を選んだのに、放置時間きっかりまで置いてしまったために甚だしく茶髪になってしまってすぐ様ナチュラルブラックに戻して今に至ります。ただ、３ヶ月もたてば微妙にプリン状態になってきたのでどうやって新しく生えてきた髪を染めようか決めかねています。範囲も範囲だし、オキシドールでさっさと済まそうかとも思いましたがかなり痛むと聞きますし、市販のちゃんとしたものを買ってまたやるならどの位で洗い流していいかもわからないのでいい方法を教えてください！(美容室は高くて行けません…)

自転車でスーパーに行きましたが、自転車をそのまま駐輪したまま帰宅してしまいました。 １週間後に取りに行ったところ、駐輪代として１５，０００円の請求を受けました。 そのスーパーの駐輪代金は９０分までは無料だけど、その後は１時間毎に２００円掛かります。 つまり、２，４００円／日。 １週間放置したため１６，８００円であるが、最大料金として１５，０００円を設定している。 よって、１５，０００円を支払う必要があるとのことです。 １週間で１５，０００円の請求は高すぎませんか。 （周辺の月極め駐輪場は２，０００円／月くらいです） このような請求は非常識な高額請求でしょうか、それとも正当な金額請求でしょうか。

東芝のダイナブック、土曜日まで元気に活動していました。 日曜日の朝、慌ててたのもあって水をこぼしてしまいました。慌てて拭き取ったのですが、３時間後くらいに電源を入れたら『ピーピー』って言い出してそのうちにマウスが使えなくなり、サポートセンターに連絡し、指示通りに動かしてみたら最終的に電源まで入らなくなりました。 今は電池パックも抜いて放置状態です。 サポートセンターからは修理代に１２万かかりますと言われ保留にしました。 もう動かないこのPCをオークションに出し、次のPCの資金にしたいと思います。 電源も入らない状態でオークションに出す事は可能でしょうか？買ってまだ１年しか経っていません！！ アドバイスを宜しくお願いします！！

ハンドメイドでピアスを作ろうと思い、天然石のガーネットとピアスポストを接着剤でつけました。 ガーネットは3～4mmほど、ピアスポストは3mmの大きさです。 ピアスはメッキ加工されています。 使った接着剤は、KAWAGUTIの多目的クラフトボンドNeoです。 接着の仕方は付属のヘラで、ガーネットとピアスポストの両面に薄く塗り、張り合わせたあと丸3日間放置しました。 接着剤の説明には約24時間で完全硬化する、と書いてあったので「もうくっついてるだろう」と思い少し強めに引っ張ったらポロリ、と割と簡単に剥がれてしまいました。 2液タイプの接着剤であれば、このように取れなくなりますか？ 他にも何種類か作ったのですが全部取れてしまいました...。

　 Windows 10 のＰＣ起動時の Wi-Fi が利用可能になるまで時間がかかる場合が多いので、改善方法があれば教えてください。 ＰＣ起動直後のデスクトップのシステムアイコンのネットワーク（Wi-Fi）で、「未接続・使用可能な接続はありません」表示からＳＳＩＤが表示されるまで時間がかかる場合が多いです。 先ほどタイマーで測ってみたら、２分１０秒でした。 早い時（すぐに使用可能）もあれば、かなりの時間放置しないと使用可能にならない場合もあります。時間がかかる時の方が多いです。 使用可能になっていない場合でも、Wi-Fi のオフ・オンですぐに使用可能にはなりますが、毎回この操作をするのは煩わしいです。 なお、一度接続できてしまえば安定して利用可能です。 ＳＳＤのため、セキュリティソフトなどの起動はとても早いです。 ですので Wi-Fi が利用できるまで時間がかかるのが腑に落ちません。 また、ネットワークアダプタの名称とドライババージョンは下記のとおりです。 Qualcomm Atheros AR9485 Wireless Network Adapter 2016/05/11　10.0.0.341 よろしくお願いします。 　

現在、1つのデスクトップPCに3つのモニターに つないで使用しています。 仕事の作業中は3つとも使うのですが、その他の 時間は1画面だけ使用して他の2画面は電源が入ったまま そのまま放置状態です。 電気代を含めて気にしてなかったのですが、友人から 「モニターは時間で寿命が決まるから使わない画面は 消しといた方が良いんじゃない」と言われ、使わない モニターのスイッチでON/OFFするようになりました。 これが最近面倒に感じてきたものの、つけっぱなしも気になり 始めました。 消したい画面のモニターをマウスで操作したら、 そのモニターのみスリープ状態になるなんて機能は ないですよね。