- 締切済み
赤色蛍光タンパクと…
- みんなの回答 (2)
- 専門家の回答
みんなの回答
- kazu2960
- ベストアンサー率33% (4/12)
No1さんの言うとおりですね。 普通、複数の蛍光タンパクを用いて観察を行う場合には、それぞれの色の励起波長を当てて別々に観察して画像を取り込んで、あとで合成して1枚の画像にします。
- guragura77
- ベストアンサー率68% (153/225)
今ひとつ質問の意味が分からないんですが、論文に載っている画像のことと仮定して回答します。 多重の蛍光標識をした時は、普通一色ずつ画像を取得して(この時点で色の情報はなくなっていて、光の強さの情報だけになっている。つまりグレースケールの画像)それぞれに擬似的に色をつけてから画像を重ねます。擬似的に赤と緑で色を付ければシグナルが重なった部分は黄色になります。RGBでやるんですが、RGBだと元の画像を黄色には出来ないんじゃないでしょうか。 目で見て観察するにしろ、複数の波長の励起光を同時に当てることはないと思います。
お礼
ありがとうございます! やはり、考え方そのものがマズイようですね… もう一度、勉強しなおします。
関連するQ&A
- 蛍光タンパク質の複数観察
細胞内(材料は細菌です)で二つの蛍光タンパク質を観察したいと考えているのですが、GFPと何かというのは可能でしょうか? 論文等でよく見るのはCFPとYFPだと思うのですが、GFPだとスペクトルが重なってしまい無理なのでしょうか?できれば片方はGFPを使いたいのです。 ご教授よろしくお願いいたします。
- ベストアンサー
- 生物学
- GFP(緑色蛍光蛋白)作成の遺伝子
GFP(緑色蛍光蛋白)作成の遺伝子について、ノーベル賞からみで 新聞記事になっていましたが、GFP遺伝子の特定はどのようにしてなされたのですか。 例えば 蛍光蛋白をもつくらげとそうでないものの遺伝子を比較してみつけたとか。その辺のところを知りたい。 今回その遺伝子の特定した人はノーベル賞対象の外人2人と関係ある人かどうかも。 よろしく
- ベストアンサー
- 生物学
- レポータータンパク質を利用した発現解析について
遺伝子の発現パターンや発現量を調べるときに使う方法で、5’上流域をGFPなどのレポータータンパク質遺伝子に融合させたキメラ遺伝子を作成して、それをゲノムに導入した生物においてレポータータンパク質の発現を解析する方法がありますが、 この方法では厳密には本来の遺伝子の発現パターンや量を解析しない場合がある、ということを聞きました。 どういった場合に解析ができなくなるのでしょうか?
- ベストアンサー
- 生物学
- GFP融合タンパク質と抗体が反応しません。何か良い方法はないでしょうか?
A:以下に、実験方法を書いたのですが、どこに問題があるのでしょう? B:GFPやその関連のタンパク質の融合タンパクを使われた方で抗体と反応しなかったことはありますか? Aについて、 酵母細胞内で、GFP融合タンパクを発現させて、 蛍光顕微鏡観察で発現を確認しました。 そこで、 ・WesternでGFP抗体と反応させてみたましたが、 バンドがでません。 ・免疫沈降後SDS-PAGEやって見てもだめでした。 条件を代え、 1:抗体濃度を変えたり、抗体反応も、オーバーナイトにしました。 2:Westernの条件で、PBSをTBSにしたりしました。 3:Westernで使うタンパク抽出方法は「サンプルbufferでボイル溶解」から、 「1:集菌した酵母にサンプルbuffer・プロテアーゼインヒビターを加え、加熱(100度)2:ガラスビーズを加え、ボルテックスで破砕、加熱、3:遠心」に。 抗体は、マウスIgGを使っています。 B:について、 論文で、ある種のGFPとの融合タンパクはWesternでは 抗体と反応しなかった。 と書いてあったものがあると、人づてに聞きました。 やはりTagをHAやMyc、Fragに変えたほうが良いのでしょうか? 長々とすみません。書き方が的を得ていないかもしれませんが、教えてください。お願いします。
- ベストアンサー
- 生物学
- 凍結切片の作成方法
GFP(緑色蛍光たんぱく質)の発現を観察するために、凍結切片を造りたいのですが、以前行ったときにひどく収縮してしまいました。 多少の変化は仕方ないと思っていますが、改善策はないでしょうか? 以前の作成方法は、組織片1cm3くらいを無処理で、直接液体窒素に投入し、その後-80℃に保存し、-20℃のクライオスタット内で金属製の台に包埋剤で固定し、少し厚めに切り、スライドグラスに載せ、室温で乾燥させ、そのまま蛍光顕微鏡で観察しました。 固定をするとGFPが失活してしまうと思うので、固定はできないと思います。インターネットで調べてみると、シュークロースで処理して凍結するとか、スライドグラス上ですばやく乾燥させるとかで改善できるのかな???などと想像しているのですが・・・いかがでしょうか? アドバイスお願いします。
- ベストアンサー
- 生物学
- GFPの発色団の名称
こんにちは。 さっそくなのですが、緑色蛍光タンパク質(GFP)の発色団であるp‐hydroxybenzylideneimidazolinoneに和名は存在しますか。 また、和名がない場合、ideneとimidazolinoneの部分はどう和訳すればいいのでしょうか。 教えてください。
- ベストアンサー
- 生物学
- 蛍光スペクトルについて
蛍光ペンを紙に塗って励起波長350nmで蛍光スペクトルを測定したが、黄色と緑色のペンで違いが見られなかったんですが この原因がどうしてもわかりません 教えてくれませんか?
- 締切済み
- 化学
- 蛍光色の世界的表現は?
強い蛍光色のピンクや赤、 日本語で説明する時には、ショッキングピンクとでも言えば、大体伝わるかと思いますが、 海外の人と話す際、こういう蛍光色って何と言えば伝わりますか? 蛍光黄色、蛍光緑、蛍光青・・・よく教科書などをマーキングする際の蛍光ペンの色でしょうか、 こういう色って、世界的に何と言われてますか?
- ベストアンサー
- 絵画・イラスト・デザイン
お礼
ありがとうございます。 なんとなく、実験イメージが出来てきました。。。 やったことがない~なんてのは、理由にならないだろうし、 頑張ります。