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染色時のブロッキングについて
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- BALB
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ブロッキングは蛍光標識した抗体が非特異的に細胞に反応してしまうのを防ぐために行う操作です。実際のところ、B細胞などがfcレセプターを持っているため非特異的に抗体のfc部分と結合してしまうことがあります。そのため２４G２等でそのようなfcレセプター等を全部かぶせてしまい、目的とした抗体が非特異的に反応しないようにしている訳です。ですので、ブロッキングに使う抗体は目的とする細胞が非特異的に反応してしまう部位を持っている抗体であることが条件となってきます。 使用する標識抗体によってブロッキング抗体を変更するのは使用する二次抗体がブロッキングにつかった抗体に結合しないようにするためですので、標識済みの一次抗体のみを使う場合は特に気にする必要が無いといってもいいかもしれません。
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