- ベストアンサー
CO2が100％の細胞培養
実験で使おうとしている細胞の培養条件が、CO2濃度が100％と書かれています。 推奨培地はLeiboviz's-15というもので、 開放系を想定して開発された培地とあります。 このような条件下で培養する細胞はどのような性質があるのでしょうか？ よろしくお願いいたします。
- 生物学
- 回答数1
- ありがとう数5
- みんなの回答 （1）
- 専門家の回答
質問者が選んだベストアンサー
- ベストアンサー
CO2濃度100％というのは、0%の誤記と思われます。CO2濃度100％ということは酸素を含まないということですから、細胞は死滅してしまいます。 MEMなどの培地を使ってCO2を含む空気中で培養すると、大気中にはCO2がほとんど含まれていませんから、インキュベータからの出し入れの際どうしても培地のpHが上昇してしまいます。 L-15は重炭酸系のバッファを使っていないので、CO2を含んでいない空気中に放置してもpHが上昇しません。そのため開放系で使用することができます。 またエネルギー源としてグルコースを使う培地では、乳酸が産生されるためpHが低下します。L-15ではグルコースの代わりにガラクトースとピルビン酸を使っているため、pHが低下しにくくなっています。 したがってL-15を使うのは、pHの変化に対して敏感な細胞である場合が多いです。
関連するQ&A
- 接着性の細胞培養が上手く行きません
接着性の細胞培養が上手く行きません こんにちわ。初めて投稿します。私は大学の研究室で接着性の細胞（ＲＢＬ－２Ｈ３ ラットガン好塩基球細胞）の培養をおこなっているのですが、本来フラスコに接着するはずの細胞が剥がれて培養液中に浮遊する減少が相次いで困っています。 培地は10%FCSを含んだＤＭＥＭ培地（抗生物質：カナマイシン硫酸塩含む） 培養はＴ２５ｃｍ２フラスコで３７℃、５％ＣＯ２インキュベーターで行っています。 実験に使用しているチップは定期的にオートクレーブで滅菌していますし、培地を入れるメディウムびんも滅菌してちゃんとフィルターろ過も行っています。 細胞培養をはじめてから約３ヶ月で、以前は上手くいっていたのですがここ２週前から突然細胞の接着が起きないようになってしまいました。初めは細胞を起こした期間が長かったことが原因と考えて新しい細胞を起こしてみたのですが一向に改善されずに困っています。 一応培地は7.5%NaHCO3で赤～赤味を帯びたオレンジ色にまでｐＨをあわせてみたのですが、培地に何か問題があるのでしょうか？回答の程をお願いいたします。
- 締切済み
- 生物学
- 細胞培養について
細胞の増殖が悪く困っています。 細胞はRBL-2H3(ラット好塩基球白血病細胞)細胞株で、付着性の細胞です。 培地にはMEM培地（10％）を使っています。 培養条件は37℃で5％CO2、25cm2の細胞培養用フラスコに培地5mLで育てています。 凍結保存していた株を先月新しく起こしたところ増殖が悪く、何度起こし直しても改善されず困っています。 春から夏にかけて同じLotの株を起こして培養していた時には問題なく増殖が見られたのですが・・・ 具体的には。 通常は播種から３～４日でコンフルエントになるのですが、現状では１週間経ってもコンフルエントには遠い状況です。 播種から２日目までは比較的正常のペースで増殖しているように見えるのですが、それ以降にほとんど増えなくなってしまうのです。 また最近では、細胞内に今まで見られなかった空胞を持つ個体が多く観察されるようになり、関連があるのではと疑っています。 これまでに、対策として培地の作り直し、インキュベーターの清掃等を試みましたが、効果が見られません。 何かアドバイスやヒントになりそうなことだけでも構いませんので、助言を下さいm(u＿u;)m
- ベストアンサー
- 生物学
- 細胞培養とウイルス培養に関して。
もの凄い初歩的な質問でしたら、申し訳ありません。 タイトルにもありますが、細胞培養とウイルス培養って何が違うのでしょうか？ 私なりの解釈だと、 細胞培養は、寒天培地などの人工培地に、細胞液？を添加して培養するのに対して、 ウイルス培養は、ウイルスを何かの細胞に組み込んで、それを培養するという解釈ですが、どうなんでしょうか？ また、細胞培養、ウイルス培養ともに培養ですが、使用器具や操作方法などに違いはあるのでしょうか？ 回答いただけるととても助かります。 よろしくお願いします。
- ベストアンサー
- 生物学
- 293細胞の培養方法について
先々週に293細胞を起こしましたが（ストックは１年半ほど前のもの）、なかなか増えてくれません。ほとんんどの細胞が浮いていて、接着している細胞も塊のようになっている状態です。どなたか293細胞を使用したことがある方、培養のコツのようなものがありましたら教えてください。よろしくお願いします。 培地はDMEM（high glucose）、継代の時はPBS-EDTAを使用し、37℃,5% CO2のインキュベーターで培養しています。
- 締切済み
- 生物学
- 細胞培養がうまくいきません。
接着性の細胞を液体培地で培養していますが、コンタミして困っています。 培養液には、抗生物質、抗真菌剤を加え、実験で使う器具はＵＶ照射して使用しています。 培養容器は、フラスコです。インキュベーター内では、キャップを緩めて細胞が呼吸できるようにしています。 インキュベーターの湿度を保つために滅菌蒸留水を入れ、ＳＤＳを加えています。 ここで、ふと疑問なんですが、インキュベーター内でキャップを緩めなくてはならない場合は、アルコール消毒してからインキュベーターに入れたらよいのでしょうか？しなくてもよいのでしょうか？ 現在は、インキュベーター内にフラスコを入れる際に、70％エタノールを吹き付けて入れているんですが、これだと、カビが生えてしまいます。（フラスコの外側に）
- ベストアンサー
- 生物学
- 昆虫細胞培養について
昆虫細胞（sf21）を今培養してるのですが、1度コンタミさせてしまい、培地を変えて新しくお越しなおしたのですが、それも3時間ほどで白くにごってしまいました・・・、これってやはりコンタミでしょうか？ 昆虫細胞を培養するコツなどありましたら、ご返答お願いします。
- ベストアンサー
- 生物学
- カイコの細胞培養について。
今まで、人ガン細胞培養を行っておりましたが、カイコの細胞培養も行わないといけないこととなりました。 人ガン細胞の培養方法とは、培養液が違う点、培養温度を２５度前後にする点、ＣＯ２インキュベーター内ではなく通常のインキュベーター使用をする点、以外に注意することはございますでしょうか？ ＣＯ２インキュベーターを用いないという点が一番不思議に思ったのですが、昆虫系の細胞培養というのはこれが普通なのでしょうか？ カイコ細胞培養などに詳しい方にご教授願えましたら幸いです。 よろしくお願いいたします。
- ベストアンサー
- 生物学
お礼
ご回答ありがとうございました。ご指摘のとおり100％ではなく0％の間違いでした。すみません。 とても参考になりました。ありがとうございました。