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パラフィンブロックを１μ前後に、薄切出来ず困っています
パラフィンブロックを１μ前後に、薄切出来ず困っています いつも切片が厚くて、注意されるのですがなかなか上手くいきません。 コツがあったら教えて下さい 初心者なので、ミクリトーム刃からうまく切片をスライドガラスにうつすコツもお願いします。
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こんにちは、いつもお世話になってます(^_^) 皮下組織を含む皮膚組織を包埋した パラフィンブロックを薄切して 3μm厚のパラフィン切片を作製しています。 薄切するところまではいいのですが…、 悩みは次の二つです。 (1)伸展版にスライドグラスを置いて 30分くらい経って切片を見てみると 組織のなかに（スライドグラスと切片の間に） 泡ぶくというか水泡のような盛りあがり ができている。 (2)脂肪組織を多く含む大きめの切片は 伸展版にのせておくと花開くように 分解して組織がくずれてしまう。 原形を保ったままきちんとスライドグラスに 貼り付けたいです…。 改善できるよい方法をお知りの方、ご教授願います。 ちなみに、 使っているスライドグラスはアルブミンスライドです。 伸展版にのせたあとは十分に水分をろ紙で除いています。 伸展版の温度は45～48度の設定です。 油分が残らないように手はしっかり洗ってから行っています。
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いまさら、で、かつこんなところで聞くのもすみません、という感じなんですが、本当に困っております。どうかどなたかお教えください。 パラフィンブロックをマイクロトームで５ないし7umで（脳切片）切り落としているんですが、最近だんだん切片がしろくなるようになりました。以前はあたたかいお湯の上に（何度だったかわかりません、waterbathをメモリで覚えていたのが問題でした）のせてスライドですくってそのままお湯を切るためにしばらく立てかけておいてあとは37度で一晩おいていました。それでおおむね良かったのですが、それも時々は白くなっていました。 最近久しぶりに切り始めたのですが50度の湯浴にうかべて（これがあついのかすぐに割れ始めたりパラフィンがこなごなにきたなく分離するので40度くらいのお湯にかえてみて、サンプルはよくのびて溶けすぎるのはなくなりました）、そのあとすくって放置するのですがすぐに白ーく粉吹き団子のようなしろい切片になるのです。５６度のホットプレートでもう一度とかしたりしているのですがそのあとひやすとやっぱり白いようです。いったいどういう条件が切片を白くさせるのかわかりません。どなたかご教示ください。 また、ブロックを切るときに切片が二つ三つと別れて、ときにはたこの足かシュレッダーかさえ思うような感じに切れてしまいます。どうやってこれを回避すればいいのかわかりません。余分なパラフィン部を削ったり、冷やしたり（これでいいこともありますが脳は冷やさない方がいいとも言われた事もあります）、息を吹きかけたり（これも結構いいときもあります）、と言われた事はやっているのですが、ブロックの四角い面が全部おおむねつながって切り落とされる事がありません。つながってさえいれば、しわしわでもくるくるでも問題ないのですがいつもばらばらなので最近閉口しています。どなたかご教示を。 最後に、静電気がひどくてたこ足切片をピンセットではじをつかもうならあっというまに切片がひっくり返ってまとわりつきこれも困ってます。静電気についてご存知の方、なにかお知恵を。
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お礼
御回答頂き、本当に有難う御座いました。 回答を参考にさせて頂くとともに、病理の先輩方から技術を学び、 今後の業務に生かして行きたいと思います。