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形質転換(トランスフォーメーション)の手順で「氷上での放置」について
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- otx
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>なぜコンピテントセルとプラスミドDNAを混ぜた後、「氷上で30~60分間放置」するのですか? 化学的な根拠は詳しくは知りません。 ただ、何となく、 大腸菌とDNAが、ほどよくまざり細胞表面等にDNAがまぶされる必要がある 低温の方が、傷だらけの大腸菌にやさしい、DNAの分解等も防げる とか、聞いたことがあります。 >両液をピペッティングなどでよく混ぜた後、 前の質問の回答でも書きましたが、大腸菌は処理されて「ゆるゆる」なので ピペッティングすると死んだりします。やめた方が良いです。
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