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直接＆関接蛍光抗体染色法について
タイトルの通りですが、二つの違いについて調べています。 そこで 問）抗体による蛍光染色の際に、抗体を二つ使うのが主流ですが、１つでもよい場合がある理由について また、その二つのそれぞれの特徴や利点について 教えていただけたらうれしいです。 できればそれについて書かれているサイトなどもあれば・・・・
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>抗体を二つ使う は，標的抗原に対する１次抗体＋１次抗体に対する２次抗体（蛍光標識）を使う方式ということでしょうか？また， >１つでもよい場合 は，蛍光標識した１次抗体を使う，という理解でよいでしょうか？ もしも，標的抗原に対する高い特異性とアフィニティを有する蛍光標識１次抗体をお持ちであれば，その１次抗体で直接蛍光染色するに越したことはありません．時間も手順も短くなりますし，おそらく感度もより高くなるでしょう． ただし，一般的に，任意の標的抗原に対する蛍光標識１次抗体が市販されているとも限りません．そのような蛍光標識１次抗体が手元にない場合，（１次抗体に特異的に結合する）市販の蛍光標識２次抗体を使うことになるでしょう． 最低限，精製品の１次抗体が入手可能であれば，それを蛍光標識することはそれほど難しくありません．一方，たとえばBSAと混合して出荷された１次抗体や，血清のまま出荷された１次抗体を使う場合，抗体のみを蛍光標識するのは，面倒な仕事です．このような場合は，やはり，蛍光標識２次抗体等を使う方がずっと便利だと思います．
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ありがとうございました。