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大腸菌培養液 ずっと使えますか?

研究で組み換えタンパクを作っているものです。 タンパク発現をさせる際に、5mlのスモールカルチャーから3mlとり、500ml培養液で発現させるというのをしているのですが、かなりのペースで繰り返しています。 そこで思ったのですが、このスモールカルチャーの液はずっと使ってもいいのでしょうか?つまり、また3mlほど液を足して培養し、3mlをラージカルチャーへ、というのを半永久的にできるのでしょうか? プレートから拾ってくるよりも短時間で増えるので、可能なら楽になるのですが・・・。

質問者が選んだベストアンサー

  • ベストアンサー
  • oil-sour
  • ベストアンサー率68% (34/50)
回答No.2

プラスミドに変異が起こる可能性があるので、できれば1~2週に一度のペースで凍結ストックから起こし直すことをお勧めします。 組み替えタンパク質とのことなので、抗生剤をどこかでうっかり忘れると、たちまちプラスミドも失われる・・・可能性もあります。

その他の回答 (2)

  • RNase_P
  • ベストアンサー率34% (9/26)
回答No.3

コンタミの可能性が跳ね上がりますし 抗生物質によってはプラスミドが落ちる可能性も高いです。 発現状態も変わることがありますし オススメできません。

  • ga111
  • ベストアンサー率26% (247/916)
回答No.1

ダメなときも、いいときもあります。何回かやって大丈夫なら、その回数までは大丈夫ということです。 ダメな場合というのは、発現系が良すぎる、蛋白が菌に有害な場合などです。菌がそのプラスミドを嫌います。プレート上でもそれは起きます。 私は、つねにダメな場合を想定して、フレッシュに形質転換します。

innocentboy
質問者

お礼

ご回答ありがとうございます。 やっぱり地道にやるしかないんですかね。

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