吸光度測定のリニアリティについて
- 吸光度測定のリニアリティについて質問です。液体の濃度と吸光度の関係を測定した結果、濃度がある値までは比例関係になっているが、それ以降は比例関係がくずれる現象が起きています。
- なぜ液体の吸光度測定で濃度との比例関係がくずれるのか疑問に思っています。
- 液体の濃度と吸光度の関係を測定すると、濃度がある値までは直線的な比例関係が見られるが、濃度が高くなるとその関係性が乱れる理由について教えてください。
- 締切済み
吸光度測定のリニアリティ
吸光度測定のリニアリティについて質問です。 ある液体の濃度と吸光度の関係を測定したところ、 濃度がある値までは比例関係になっているのですが、 濃度が高くなると、その比例関係がくずれてしまいます。 いったい、なぜでしょうか？
- 化学
- 回答数1
- ありがとう数0
- みんなの回答 （1）
- 専門家の回答
みんなの回答
ランバート・ベールの法則では濃度と吸光度の関係は線形です。しかし、濃度が高すぎると測定器の検出限界を超えてしまい、線形が崩れてしまうのではないでしょうか？測定器の仕様書に線形性を補償する、濃度（吸光度）範囲というのがあるかもしれません。 学生のころ、紫外可視分光光度計の測定の濃度は１abs以下としろ、とか赤外では3abs以下としろ、とか言われてました。 日本分光のHPには紫外分光光度計の測定精度については１abs以下のデータしかありませんでした。 直接分光光度計メーカに聞いてみるのもいいかもしれません。
関連するQ&A
- DNA 吸光度測定について
先週DNA抽出を行い、純度と濃度を測るため,吸光度測定を行いました。ブランク等の設定は先生がやっていたのでそこは正確だと思います。自分の抽出したDNAの吸光度を測定してみると、a320が負の値になっていました。何故でしょうか。因みに値は－0.001です。
- 締切済み
- 生物学
- 吸光度測定
吸光度測定の際、濃度の薄い溶液から測定するのはなぜでしょうか？？ こんなふうに考えましたが正しいでしょうか？？ 今回の実験では測定時に同じセルを使用したため、前に測定したサンプルの濃度が影響しないようにするため。濃度の高い溶液を測定した後に濃度の低い溶液を測定すると、測定した濃度の高い溶液を低い溶液で共洗いしたとしても、希釈することができず、濃度の低い溶液の濃度が本来の測定すべき濃度よりも高くなり、大きな誤差が生じる可能性があるため適さない。一方、濃度の低い溶液から測定すれば、共洗い時に希釈が上手く行われ、誤差が生じることもほとんどないため濃度の低い溶液の測定から行う方がよい。
- ベストアンサー
- 化学
- 分光光度計・吸光度とは？
ある液体の濃度測定をお願いしたところ、「分光光度計にて595nmにおける吸光度を測定する」と言われました。僕にはさっぱり意味が分からず、結果の数値を見ても人に説明できません。で、分光光度計とは？吸光度とは何でしょうか？何を測定したのでしょうか？まったくの無知なもので、よろしくお願いします。
- ベストアンサー
- 化学
- 原子吸光分析における吸光度
実験で原子吸光分析による、濃度測定の実験を行ったのですが、 吸光分析で吸光度が0.5以上の値は信用できないと先輩に聞きました。 なぜ？と質問しても理由まではわからないと言う答えで、分析化学の本などを調べましたが書かれているのは原理などばかりで、吸光度の信頼性などについては書かれていませんでした。 どなたかご存知の方教えてもらえませんでしょうか、宜しくお願いします。
- ベストアンサー
- 化学
- DNA，RNAの吸光度（濃度）測定について
よく核酸の濃度測定をするのですが，測定の際いつも240nm～320nmの吸光度のグラフを確認しています． そこでお聞きしたいのですが， （１）普段は260nmで核酸の吸光度がピークに達し，きれいな山型が描かれますが，時折，240nmの値が高めで右肩下がりのグラフになってしまうことがあります．280nmの吸光度が高いのは蛋白が混入しているものと認識しているのですが，260nm以下の領域が高くなる時はどういったことが考えられるのでしょうか． （２）それともう一点，吸光度の比『A260/A280値』で，純度が高ければDNAは1.8，RNAは2.0で，当然蛋白が混入すれば比は1.8未満になるのは理解できるのですが，特にRNA濃度の測定の際，比が2.2近くになる事があり，それがどういう意味を持っているのか知りたいと思っています． どちらか一方でも構いませんので，ご存知の方がおりましたら分かりやすく教えていただきたいと思っています．よろしくお願いいたします．
- ベストアンサー
- 生物学
- 吸光度によるプロテアーゼ活性測定について
プロテアーゼ活性についていまいち理解できないので教えて頂きたいです。 今回、ヘモグロビン溶液に、5μg/ml、10μg/ml、15μg/mlに希釈したペプシン溶液を加え、TCA溶液で反応を止めて、遠心分離してできた上澄み液の吸光度を測定する実験でした。 また、それぞれの濃度には1本のブランクを用意し、ヘモグロビン溶液にあらかじめTCA溶液を加えておき、そこに各濃度のペプシン溶液を加えて吸光度を測定しました。 教本に「反応液の吸光度からブランクの吸光度を差し引いた値がプロテアーゼによって遊離してきたアミノ酸量に相当する。 反応液中のTCA可溶性物質（遊離したアミノ酸）の280nmでの吸光度0.001の1分間あたりの変化が1単位に相当する。 1単位＝280nmでの0.001の吸光度変化/1分間」と書かれており、 プロテアーゼ活性を計算しなくてはならないのですが… そもそもプロテアーゼ活性とは何なんでしょうか…。調べはしましたが、文献に載っておらず、いまいち理解できませんでした。 それから、例えば、吸光度が 反応液：0.830 ブランク：0.339 の場合、単位は何単位になるのでしょうか？ 回答下さると助かります。宜しくお願いします。
- ベストアンサー
- 生物学
- 吸光度測定で4-ニトロアニリンを用いて・・・
質問失礼します。 吸光度測定からHammettの酸度関数を算出する実験で 基準物質をｐ-ニトロアニリンとして測定するのですが 酸性物質とｐ-ニトロアニリンがどのように反応して どういった生成物のせいで吸光度が下がるのでしょうか？ また、Hammett酸度関数のパラメータは濃度のようですが これはそのまま吸光度に置き換えて計算してしまって構わないのでしょうか？ ふたつも質問してしまい面倒とは思いますが 何卒教えていただけると助かります
- ベストアンサー
- 化学
