Tris powderの使い道

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このQ&Aのポイント
  • 酵素の精製におけるTris powderの役割について調べました。実験では硫安や酢酸亜鉛を使用して酵素タンパクを沈殿させる手法が一般的ですが、Tris powderを加えることでpHを7.0で一定に保つことができます。
  • Tris powderは酵素の精製実験でよく使用される物質であり、酵素タンパクを沈殿させる際に加えられます。この際、沈殿物のpHの変動を抑えるためにpHを7.0で一定に保つ必要があります。
  • 知人の実験ではpH調製を行わずに硫安を加えていますが、硫安を加えることで沈殿物のpHの変動が大きくなる可能性があります。したがって、Tris powderを使用することでpHを一定に保つことができるため、実験の信頼性を高めることができます。
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Ｔｒｉｓ　powder の使い道

酵素の精製を紹介する文献の一文で The enzyme in the culture supernatant was precipitated by the addition ammonium sulfate to 90% saturation or of solid zinc acetate to the final concentration of 1 mol/l with stirring in an ice bath; Tris powder was added to keep the pH close to 7.0 throughout. という部分があるのですが、 最初の分は硫安と酢酸亜鉛(固体)を使って 酵素タンパクを沈殿させるという手法の説明で 下の文がトリスパウダーを加えてどうこうという。 pHを7.0で一定とする為に入れるのかと思うのですが、 沈殿させている段階で加えてしまうのでしょか？ 知人の実験ではpH調製などしていませんが、 硫安を入れると(沈殿物の)pHの変動は 大きいものなのでしょうか？

質問者が選んだベストアンサー

  • ベストアンサー
  • mizu_atsu
  • ベストアンサー率41% (180/433)
回答No.1

そもそもその酵素が酸性に極度に弱いのかもしれません。 もしそうなら90％飽和硫安による酸性化は無視できないのかもしれません。私も硫安塩析はやりました。 どのくらいpHが変わるのか計ってみたこともあります。 それなりに下がってましたね（どの位下がったかは失念、70％飽和でpH7→5.5くらいだったかなぁ？？バッファーの濃度にもよると思うけど）。 トリスを塩析中に加えたことはありませんが、pHを一定にするなら硫安を入れるときに両方少しずついれるのでは？と思います。

rheart
質問者

お礼

そうですか、判りました。 アドバイスありがとうございます！

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