- ベストアンサー
限界希釈法について
- みんなの回答 (1)
- 専門家の回答
質問者が選んだベストアンサー
- ベストアンサー
細胞懸濁液をかなり薄く培地でうすめて,96穴などに1滴ずつピペット落とします.このまま2~3週間37℃で培養すると,1つの細胞から広がったコロニーができます.これを徐々にスケールアップ(96穴-24穴-6cmディッシュ・・・)するのが限界希釈法です. かなり薄く懸濁したほうがいいです.シングルセル由来のクローンをとりたいということであれば.
関連するQ&A
- 限界希釈法による細胞のクローニング
96穴プレートで限界希釈法による細胞のクローニングを行っているのですが初めての作業でやり方がいまいち分かりません。 1つの穴に細胞が1つ入っているかを確認するのに1穴1穴顕微鏡で確認しているのですが、顕微鏡で探すのに手間がかかり、細胞が冷えてしまいます。 通常どのように確認されているのでしょうか? 経験者の方いらっしゃいましたらお手数ですが、ご教示の程よろしくお願い致します。
- 締切済み
- 生物学
- 限界原形質分離の見極め方について
一般的な高校生物実験において、0.1%~0.5%ショ糖水溶液にユキノシタ葉裏表皮細胞を浸し、その変化を観察して限界原形質分離の濃度を見極めます。このとき、細胞の何%が原形質分離をしていたときに、「限界原形質分離」の濃度だと決定しますか?
- ベストアンサー
- 生物学
- 同位体希釈法の逆希釈法に関しまして。
今、放射科学の勉強をしていて同位体希釈法のところで疑問に思った点がありましたので質問させて頂きます。 逆希釈法では重量が未知で比放射能が既知の放射性同位体に、同じ元素の安定同位体を導入することで放射性同位体の重量を求めるという方法だと思うのですが、 比放射能がわかっているので、安定同位体をいれずに、そのものの全放射能を液シンやGM等で測定することで、重量が出せるのではないでしょうか。 この部分に疑問を感じてしまい、逆希釈法の存在意義みたいなものがよくわからなくなってしまいました。 わかるかたがいらっしゃいましたら宜しくお願い致します。
- 締切済み
- 科学
- DMSO溶液の希釈について(段階希釈?一発希釈?)
よろしくお願いいたします。 4点お聞きします。 1.例えば脂溶性の低分子化合物をDMSOで溶解させ、それを緩衝液で8 倍希釈したい場合、次のどちらのほうが溶解性がいいのでしょう か? A.一気に8倍希釈 B.2倍希釈を3回(各希釈段階で振とうなどを行う) 2.脂溶性の化合物がDMSOを介して緩衝液に溶けているということは、 両親媒性であるDMSOが化合物と水の間に入り、溶けているように 見えるということでしょうか? 3.もし2で記載したことが合っているのであれば、DMSOで溶解した 化合物を水に溶かした際は、振とう等をあまり激しくすると 再結晶化(?)してしまうのでしょうか? (イメージとして化合物が1分子づつDMSOに包まれていたのが、 振とうすることにより化合物同士が出会い2分子、3分子と くっついてしまうような… 化学的な表現でなく申し訳ありません。) 4.DMSO以上に溶解性の高い溶媒は何があるでしょうか? 溶解させた化合物は緩衝液で希釈し、細胞実験に用いたい と考えています。 長文申し訳ありません。 なんとしても溶解させたい化合物が溶解できず困っております。 よろしくお願いいたします。
- 締切済み
- 化学
- 希釈する時に考えること
宜しくお願いいたします。 最近希釈の計算をする時に考えることがあります。 例えばAという物質を100mg秤り、100mLにうすめました。 これを40倍希釈しようと思ったときに、 すぐ頭で、 「4mLのホールピペットでとって10mLのメスフラスコに いれよう。これで40倍希釈だ。」 と考えます。(使う量にもよりますが・・・) でも、「どのような計算でこうなるのでしょうか?」 普段あたりまえすぎて計算の過程がよく分からなくなってしまいました。(恥ずかしながら・・・) 一応思ったのは 4÷10X100=40 だったのですが、なぜ100かけてるのだろう?と思い分からなくなりました。 説明が出来る方、宜しくおねがいいたします。
- ベストアンサー
- 化学
- ケルダール法でサンプルの希釈について
大学で飼料中のタンパクの分析を行う際、ケルダール分解法を習ったのですが、いまいち理解できていない箇所があります。サンプル調整のときに、濃硫酸や反応促進剤を加えて加熱し、その後、ケルダールフラスコ内の溶液を蒸留水で2~3倍に薄めてからメスシリンダーへ移して希釈するのは何のためでしょうか?それから、サンプル調整後、蒸留装置で蒸留操作を行いますが、扱う試料溶液は10mlです。すると、希釈して残った溶液はどうしたのか、自分ではっきり覚えてないんです。さすがにそれを廃棄するのもなんですし、使うといっても一回の蒸留操作では限られた量しか扱いません。経験者の方で分かる方はこれらの疑問を教しえていただけないでしょうか?
- 締切済み
- 化学
お礼
sa_ke_no_mi さん。お礼が遅れてすいません。 本当に助かりました!! sa_ke_no_mi さんは生物系の知識が豊富なんですね。うらやましいです。