HPLCの保持時間が遅くなる原因と対策
- 校正をしようと校正専用のODSカラムにて測定していると、繰り返し測定するにつれ、保持時間が遅くなり、面積も大きくなる現象が発生しています。
- 移動相（アセトニトリル：水＝４：１）はポンプが１台しかないため、事前に混合して使用していますが、保持時間の早くなる現象はメーカーサポートでも聞いたことがないとのことです。
- 送液ポンプのバルブ洗浄をIPAで行ったり、移動相を十分に流しても症状は改善されず、ポンプ圧も一定している状況です。
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HPLCの保持時間が遅くなります。
HPLCの保持時間が遅くなります。 校正をしようと校正専用のODSカラムにて測定しているんですが、 繰り返し測定するにつれ、徐々に保持時間が遅くなり、面積も大きくなります。保持時間が早くなるならカラムの劣化も考えられるのですが…また、移動相（アセトニトリル：水＝４：１）もポンプが１台しかないので事前に混合してます。メーカーサポートに電話でアドバイスしてもらったのですが、保持時間が早くなる現象は聞いたことあるんですが…とのこと。一応、送液ポンプのバルブ洗浄をIPAで行ってみたのですが、症状は改善されず。移動相も十分に流しても改善されず。ポンプ圧も一定している状況です。 HPLCは使用頻度が少ないので、久々に動かしたら…こんな症状です。 どなたか、アドバイスいただけると色々試せるんんですが。ご存知の方お願いします。
- amya
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質問者が選んだベストアンサー
N0.2です再回答します。 質問：カラム洗浄に従来の移動相以外のものがないか。 カラムメーカに聞くのが早道です。 私の経験では、アセトンを使いました、流量は従来の1/5くらいです。
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- km1939
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Ｎｏ１さんの１～３までを確認しても異常なければ、廃液の量を計って、流量変化の有無を確認 して下さい。 異常なければ、一昼夜位カラム洗浄をした見てください。
お礼
アドバイスありがとうございます。 流量を測定して、異常がなければ カラム洗浄を一昼夜。ですね。 そうなった場合、移動層にアセトニトリルと 水の混合溶液を使用していますが、これで ないとだめでしょうか。 アセトニトリルは貴重でして・・・
- ryokei14
- ベストアンサー率33% (1/3)
１．プレッシャー値が高くなってませんか？ インジェクションする液のろ過が不十分かも。 ２．相互作用の強い検体を分析にかけた後ではありませんか？ 両親媒性物質やキレートを作るリガンドとなる有機物など。 ３．予備カラムに替えてみて、症状をみてください。 何をかけているのか書いてあると、もっと見ている人がアドバイスしやすいとおもいますが・・・
お礼
アドバイスありがとうございます。 圧力は、高くありません。（ODSカラムφ4.6×250mmカラムの使用で圧力は6～7MPa） また、分析にかけようとしているのはアクリジンです。 （溶解はアセニトのみ） そして、最初カラム劣化を疑って別のカラムに交換してみましたが 同じような現象となり、カラムではなく装置側に起因するものと 考えています。 また、本条件で毎回校正をしていますが、稼働率があったことは 問題なくできていたようです。
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