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ベクターの分子内ライゲーションについて。
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ライゲーション反応を行うときに、よほど高濃度にすればベクター同士がうまく接合する可能性はあるとおもいますが、常識の範囲内の濃度でself ligationを行うときはほとんどの確率で単分子でライゲーションしてくれます。心配であればtransformationの効率を計算してplasmidを薄めてligation すれば大丈夫です。 また見分け方ですが、単純に何もenzymeでcutせずにagarose gelに泳動すれば大きさで判別がつきます。
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- 生物学
お礼
ありがとうございましたm(_ _)m 常識範囲内の濃度でligationを行い、Miniprep後、enzyme cutなしで泳動したところ、pick upしたコロニーすべてでself ligationが確認できました。大変勉強になりました。