- 締切済み
抗原抗体反応のモデル系
これから研究室で新たにタンパク質の検出実験を行いたいと考えています。（バイオ系は素人です） まずはモデル系を用いて、ELIZAが正常に行えるか試してみたいのですが、カタログをみても山のように種類があり、どれを選んでよいのかわかりません。 ELIZAについてモデル系といわれるような系があれば教えてください。 また、ELIZAのキットも様々な種類があり、よくわかりませんでした。 マイクロプレートではなく、自作の基板上でELIZAを行いたいのですが、抗原・抗体・酵素標識抗体が液体の試薬としてセットになっているようなものはあるのでしょうか。 曖昧な質問で恐縮ですが、よろしくお願いいたします。
- renrin1027
- お礼率75% (3/4)
- 生物学
- 回答数1
- ありがとう数1
- みんなの回答 （1）
- 専門家の回答
みんなの回答
- MIYD
- ベストアンサー率44% (405/905)
>モデル モデル系と呼ばれるものは無いと思います。 臨床で用いられるもので、症例数の多いものをメーカーに相談されてはいかがでしょうか。 >セット ELIZA 自作キット で調べれば出てくると思います。 出入りの業者さんに飼料が欲しいといえば、探してきてくれるでしょう。 大学に生物系の研究室があるのならば、そちらに相談してもいいでしょう。
関連するQ&A
- ELASA法 抗原抗体反応
抗原抗体反応のELISA法でウェルを使って、実験したんですが、PBSに標識二次抗体と基質溶液を入れたんですが、PBSに抗原は入っていないのに、反応しました。なんでですか？？
- 締切済み
- 化学
- 抗原・抗体の購入方法について
抗原・抗体の購入方法について はじめまして、バイオの機器の要素研究を始めようと思っている会社員です。 バイオ自体は疎く、もっぱらネットサーフィンで調べているのでみ、 色々わからないことがあり質問させてください 抗原抗体反応を液中で起こしそれを蛍光法で検出する系を検討しています。 装置のほうは本職なので必要なものを購入できるのですが、テストをするための 抗原・抗体をどこから買っていいのか？悩みながら色々調べています。 やりたいことは、蛍光偏光法の実験です。 抗原＝０のときの偏光度 と 抗原＝あり の時の偏光度 を比較する実験です。 分子量ができるだけ大きいタンパクをという理由から 抗原は、サイログロブリン に決めました。 それと結合する抗体をネットで調べてるのですが、 どこで抗原は買うのか？抗体は色々売っているがどれを買えばいいのか？悩んでいます (1)抗原：サイログロブリン 分子量マーカーの一部として 以下で売られているようです http://www.shoko-sc.co.jp/pc/application/application18.html Thyroglobulin,(Bovine) とあります (2)一次抗体： 何社かあったのですが、 ・http://www.scbt.com/ja/table-thyroglobulin.html ・シグマ T5405 http://www.sigma-aldrich.co.jp/Search/Kotai/ species reactivity bovine, pig, human, goat, guinea pig とあります なので扱っているようです 質問は （１）抗原は、分子量マーカー以外にどこか入手先はありますか？ （２）(1)にBovine とあるので、シグマのT5405と結合すると考えてもよいのでしょうか？ （３）蛍光標識について 一次抗体 T5405に蛍光色素を直接標識する方法もあるようですが 標識２次抗体を１次抗体にあとでつけようと思っています 一次抗体がT5405の場合、２次抗体は何由来？の抗体を買えばよいのでしょうか？ 宿主や由来とかの関係がよくわかっていません よろしくおねがいします
- ベストアンサー
- 生物学
- ELISA法について
プレートに抗体を固相化→抗原反応→検出抗体→HRP標識抗体→検出といった感じのサンドイッチELISA法を構築してタンパク質の検出を行なっています。 しかし、現在測定できる範囲が200pg～1500pgと狭く、測定できる範囲を広げたいと考えています。単純に固相化抗体の量を増やせばいいのでしょうか？他にも方法があったら教えて欲しいです。
- 締切済み
- 生物学
- モノクローナル抗体とポリクローナル抗体
はじめまして、とても困っているのでよろしくお願いします。 私はある蛋白の抗原決定基を調べるために、酵素で分解しながら市販のモノクローナル抗体を用いてイムノブロットを繰り返し行い、ある程度絞れたら（小さい断片になったところで）アミノ酸シーケンスを行なう予定でいます。そこで質問です。 質問：ある蛋白ｘが抗原決定基を一つ以上持つ場合（たとえば三ヶ所）、モノクローナル抗体ではこのうちの一ヶ所にしか反応しないということでいいんでしょうか？ また、三ヶ所のうちどれに反応するかはモノクローナル抗体次第ということでしょうか？逆に動物に免疫したポリクローナル抗体では三ヶ所それぞれに反応する抗体が存在し得るということなんでしょうか？ また大きなタンパク質になるほど抗原決定基は増えると考えていいんでしょうか？ なんだか支離滅裂な文章で申し訳ありませんがよろしくお願いします。
- ベストアンサー
- 生物学
- 二次抗体の認識部位について
二次抗体は、還元型の一次抗体も認識してしまうのでしょうか？ 過去のQ&Aに、「この二次抗体に色々な標識物質（酵素抗体法では主にビオチン、その他、色々な蛍光物質、RI等）を結合させ、これを反応させ、抗原に結合した一次抗体のFc部分に結合させます。（抗原に結合する抗体の部分はFab）」という回答がありましたが、これからすると、還元型一次抗体も認識するように考えられるのですが。 ご存知の方、教えて下さい。
- ベストアンサー
- 生物学
- ELISAに使うIgG3を検出するオススメ抗体は？
細胞培養上清をサンプルに、ELISAをするのですが、その際、フナコシから購入して使っていたキットが今ひとつうまくいきません。 そこで新しいものを探しているのですが、オススメの会社はありませんか？ モノでもポリでもどちらでも結構です。 Anti-Human IgG(Fc)です。 二次抗体はHRP標識抗体です。 TMBでもいいのがあれば教えてください。 よろしくお願いします。
- 締切済み
- 生物学
- pSectag2B を用いたベクター構築と組み替え蛋白質を用いた抗体作成
現在pSectag2B発現ベクターを用いた組換え蛋白質の発現ベクターを構築しようとています。 (http://www.invitrogen.co.jp/catalogue/invitrogen/V900-20_001.shtml) 現在プライマーの構築を行っている段階ですが、どの制限酵素サイトをつけるかを考えています。 ＭＣＳの中央のあたりでつなげなければ(たとえばpSectag2BでいえばBamHIとXhoIの組み合わせ)、 N末C末両端に余計なアミノ酸残基が引っ付いてきてしまうと思います。 また、Histagとのリンカー部位も入ってきてしまいますので、生理活性に影響が出ないか少々心配なところです。 ORFの上流はできる限りシグナル配列の直下につなげたほうが良いのでしょうか？ また、リンカー配列もできるだけ短くしたほうが生理活性に影響が出る可能性は少ないのでしょうか？ さらに、上記の方法で作成した組換え蛋白質(仮に蛋白質Aとしておきます)を抗原としてマウスモノクローナル抗体(中和抗体)を作成しようと考えています。 抗原がマウスのもつその蛋白質Ａとホモロジーが非常に高いため、リンカー配列などを認識してしまうのではないかと考えています。 ホモロジーの高い抗原を用いて抗体を作成するのはやはり難しいのでしょうか？ ラビットのポリクロ抗体でも作ったほうがいいのでしょうか？ 念のため類似した質問がないか確認はしましたが、重複していたらすみません。 色々とあつかましい質問ですが、よろしくお願いいたします。
- 締切済み
- 生物学
- ＥＬＩＳＡ
ELISA法で抗原・抗体反応の実験を行ったのですがわからないことが多くて困っています。ひとつでも回答をいただけたら幸いです。 (1)96穴プレートを使用してブロッキングをしたのは抗体がプレートのプラスチックに結合するのを防ぐためと考えていますが、正しいでしょうか？？ (2)吸光度から検量線を作成しましたが、横棒一直線になってしまいましたが、なぜでしょうか？？ (3)同じ抗体の濃度でも吸光度に差がみられたのですが、これは洗浄が均等に行われなかったという解釈で正しいでしょうか？？ (4)もし今度同じ実験をするならどんな点に気をつければ成功するでしょうか？？ どならか詳しい方お願いいたします。
- ベストアンサー
- 生物学
- ELISAの固層化の条件について
タンパク溶液の中から、抗体濃度を測定するのに、ELISAによる方法を考えています。 Protein A (or G) をコーティングしたプレートを作製したいのですが、適切な固層化の条件(Buffer,反応時間,温度など)を教えていただけませんでしょうか。 またマイクロプレートの吸着性については、どういった種類のものを選べば良いのでしょうか。 注意点や他の方法などもありましたら、教えて下さい。 よろしくお願いします。
- ベストアンサー
- 生物学
