- ベストアンサー
ニューロン・細胞 培養について
次の文の意味ってどういう意味か分かりますか？ 「レンチウイルスベクターをHEK細胞にトランスフェクトし、ニューロン培養した。」 よろしくお願いします。
- みんなの回答 （1）
- 専門家の回答
質問者が選んだベストアンサー
関連するQ&A
- HEK細胞、HeLa細胞および初代培養細胞株について
HEK細胞、HeLa細胞の違いってなんでしょか？ 現在読んでいる論文に頻繁に登場してくるのですが。 HEKが小児の胚由来、HeLa細胞が子宮頸がん由来ということはわかっているのですが、実験を行う上での選択の基準は何でしょうか？ HeLaは癌細胞由来だから癌細胞のアッセイなどに使って、HEKは正常細胞を見たいときにつかうということでしょうか？ あと初代培養細胞株と通常の細胞株の違いって、初代培養細胞株は培養条件や形質転換の条件が確立されていない点で扱いにくいという理解でよろしいのでしょうか？ では初代培養細胞の利点は何かあるのでしょうか？ 当方化学系の研究室に所属しているので身近に質問できる人がいません。なにとぞよろしくおねがいいたします。
- ベストアンサー
- 生物学
- 細胞培養とウイルス培養に関して。
もの凄い初歩的な質問でしたら、申し訳ありません。 タイトルにもありますが、細胞培養とウイルス培養って何が違うのでしょうか？ 私なりの解釈だと、 細胞培養は、寒天培地などの人工培地に、細胞液？を添加して培養するのに対して、 ウイルス培養は、ウイルスを何かの細胞に組み込んで、それを培養するという解釈ですが、どうなんでしょうか？ また、細胞培養、ウイルス培養ともに培養ですが、使用器具や操作方法などに違いはあるのでしょうか？ 回答いただけるととても助かります。 よろしくお願いします。
- ベストアンサー
- 生物学
- レトロウィルスとパッケージング細胞
レトロウイルスベクターを使って遺伝子導入を行おうか検討しています。 現在、原理を勉強しているところですが、理解できないことがあるので質問させていただきます。 レトロウイルスベクターを脂質か何かで導入したパッケージング細胞はウイルスを出芽しますよね。 その出芽できるウイルスの最大数は理論上、 ウイルス出芽数＝導入されたベクター数 と考えてよいのでしょうか？ そうなると、レトロウイルスベクターを導入したパッケージング細胞を培養し続けると、いつかはレトロウイルスを出芽しなくなるのでしょうか？ となるとベクターを導入したパッケージング細胞の冷凍保存はあまり意味のないものと考えてよろしいのでしょうか？ 申し訳ありませんが、どなたか教えていただけないでしょうか。 宜しくお願いいたします。
- 締切済み
- 生物学
- 発現部位が異なる細胞を使うこと
たとえば、脳細胞特異的に発現する遺伝子を扱う際に、HEK293やHela細胞を用いて実験を行うことに実験的な意味はありますか？ 私が扱っている遺伝子は、Kidneyにおける転写産物は確認されていないのですが(Unigeneで確認)、HEK293を使ってます。 よろしくお願い致します。
- 締切済み
- 生物学
- 動物細胞培養で、perfusion cultureについて
CHO cell perfusion cultureの意味として、ＣＨＯ細胞灌流培養とありますが、灌流（perfusion)と単にCHO cell cultureとの意味の差はあるのでしょうか。また灌流の意味は？
- 締切済み
- 生物学
- 初代培養
神経細胞(グリア細胞)の初代培養について質問なのですが・・・ 初代培養をし凍結保存するまでの約1週間培養するのですが、初代培養した次の日にミクログリアの洗いをし1日あけてmediumの交換をします。 そして2日あけて次の日に凍結保存をします。 1日あけてmediumの交換を行うときまでは順調なのですが、凍結保存する当日に見てみると、細胞が減っていたり、全然増えていなかったりします。 この状態が最近1ヶ月ぐらい続いていて、どうしてこのような状態になってしまったのかわかりません。 もうすぐstockがなくなってしまいそうなので困っています。 この問題から脱出できるよい方法はないでしょうか？ よろしくお願いいたします。
- ベストアンサー
- 化学
- 細胞数のカウント（継代培養）について教えて下さい。
細胞数のカウント（継代培養）について教えて下さい。 継代培養を引き継ぎ、最近業務を始めたところです。 その時はわかったはずなのに、メモを見ても思い出せません。 メモは以下のとおりです。 8×10^4/mlを“10mlの培地に1×10^4/mlになるように”継代する場合。 1÷8＝0,125 0,125×1,000＝125μl 以上ですが、最後の×1,000の意味がわかりません。 他も何か違っていたら教えて下さい。 濃度計算がもともと苦手で、お恥ずかしいですが 詳しく解説していただけると助かります。 よろしくお願いします！
- ベストアンサー
- 生物学
- レンチウイルスベクターでの遺伝子導入とそのコピー数
レンチウイルスベクターを用いて遺伝し導入し，ある遺伝子の定常発現細胞株を作っています。実験自体は簡単ですから何の問題もないのですが，レンチに関する知識についての質問です。 非常に高い発現量を確保できるレンチウイルスベクターですが，なぜ高い発現量が安定に出し得るのでしょうか？一般的にレンチウイルスベクターでは１－２コピーしかゲノムに組み込まれないとされているのですが，Lipo系のtransfectionをして得られたstable細胞株よりも発現量は高いですよね？ このことについて何か情報・詳しい文献はありませんか？また，レンチウイルスベクターでの遺伝子導入は本当に１－２コピーしか入らないものなのでしょうか？そこも通説として聞いているだけで，実際に文献は読んだことがないので・・・ みなさまよろしくお願いします。
- 締切済み
- 生物学
- 細胞へのCre遺伝子導入
ある遺伝子をノックアウトしたマウスの繊維芽細胞(MEF)を使用して機能解析を行うために、flox マウス胎児からloxP MEF 細胞を樹立しました。 次に、CRE遺伝子を導入し、目的遺伝子を欠失させたいと考えています。 この際、導入する遺伝子はタモキシフェン誘導型CRE ERT2を用い、タモキシフェン添加下での欠失を行うべきでしょうか？それとも、培養細胞からの選択マーカーの除去のようにCRE遺伝子の導入のみで欠失できますか？ また、重ねての質問になりますが、ウイルスベクターが使用できないため、lipofectamine2000やFuGENE6等のreagentsを用いたトランスフェクションを考えているのですが、推奨ベクターやreagentsがあれば、合わせてご教授頂ければと思います。 よろしくお願いいたします。
- 締切済み
- 科学
- 「細胞内成分のコンタミ」 ご教授下さい。
「細胞内成分のコンタミ」 ご教授下さい。 あるタンパク質が細胞外に分泌されるかどうかを検討しています。 ベクターのトランスフェクション後4日間培養し、その培養液をウエスタンしたところ、 はっきりとバンドが確認できたのですが、 細胞が死んでエンドのタンパクである可能性が否定できません。 そこで、これが細胞内成分のコンタミではないことを証明したいのですが、 何か良い方法はないでしょうか？ 今のところ、分泌阻害をかけてみようと思っていますが、 何か良い試薬はありますか？また、良いアイディアがありましたらご教授下さい。
- 締切済み
- 生物学
